Phadia250全自动荧光免疫分析系统性能验证.pdfVIP

Phadia250全自动体外检测系统是由瑞典Phadia公司研制，基于荧光酶联

免疫分析法原理，以提供过敏、气喘及自体免疫疾病的临床诊断和监控为目的，

集反应、检测和数据分析为一体的全自动荧光免疫分析系统。ImmunoCAP特异

性IgE定量是检测人血清或血浆中过敏原特异性IgE的体外实验方法，是用羊抗

人IgE抗体包被的ImmunoCAP，捕获血清中存在的人体受食物和空气中变应原

攻击后所产生的特异性IgE抗体，再以荧光标记的发展液与之结合，荧光强度的

大小与待检特异性IgE的含量呈正相关。以WHO标定的IgE标准品含量的对

数做横坐标，以荧光强度为纵坐标，绘制半对数曲线，由该曲线可以确定不同的

荧光强度所对应的特异性IgE含量。PhadiaImmunoCAP检测过敏原的方法被认

为是国际过敏原检测的公认标准，其他任何一种方法都要与其进行比较。我科于

2011年购买了一台该型号的仪器，我们对该仪器的准确性、稳定性、重复性、

线性等相关性能的进行了评价，现将检测结果报告如下。

1仪器与方法

1.1仪器瑞典PhadiaAB公司生产的Phadia250全自动体外荧光免疫

分析系统。

1.2试剂ImmunoCAP特异性IgE质控品、ImmunoCAP特异性IgE校准

品（条）0100、ImmunoCAP特异性IgE酶标二抗、清洗液、底物液以及终

止液等。所用试剂及质控品均为PhadiaAB公司原装进口。

1.3加样精度分别对样本（sample）、发展液（development）和终止液（stop

solution）加样量进行测试，按IDM软件中虚拟Immuno反应盘提示，将20个已

称重量（G1）的检测ImmunoCAP放入反应盘中的正确位置，选择为

20次。执行加样操作后，将检测CAP小心取出，并立刻称重（G2）。加样重量

（G）按G=G2G1。计算20次加样的均值和CV%，CV%应小于厂家声明的加样

2%。

1.4精密度该方案在EP5文件的关于精密度方案的基础上进行改良，取

足够量的特异性IgE项目两个浓度（低值0.35kUA/L、高值100kUA/L）的阳

性质控品，每天做2批实验，批间的时间相差不少于2h，每批的样品做双份

检测，共做5d实验。一共20个结果，每对结果间的差是每批的批内差。一天

中每批双份结果的均值之间的差表示这一天的批间差。对这些批间差统计后，减

去其中的批内差，成为真正的批间不精密度［1］。并按公式（1）计算变异系数

（CV，％），变异系数应符合厂商声明的要求，批内精密度（CV，％）≤5%，

批间批间精密度（CV，％）≤5%。

1.5准确性①阳性质控品：测试特异性IgE项目三个浓度的阳性质控品

（0.35kUA/L、17.5kUA/L、100kUA/L），每个质控品测试2次，分别计算

平均值，平均值应在标称范围内。并分别计算绝对偏差=测定值靶值，相对偏差

=靶值×100%，因国际及厂家均无此项有关偏倚的声明，参照美国

临床实验室修正法规（CLIA88）规定的总允许误差［2］。允许偏倚设为15%。

②阴性质控品：测试样本稀释液和0.35kUA/L阳性质控品各2次，分别计算荧

光响应值平均值，稀释液荧光响应平均值应＜0.35kUA/L阳性质控品荧光响应

值。

1.6线性将特异性IgE浓度为90kUA/L的标本（H），混合均匀后，用专

用Diluent稀释液（L）按H、1h+5L、2h+4L、3h+3L、4h+2