第十二章-免疫学诊断技术.ppt

全国高职高专检验专业教育部卫计委规划教材《寄生虫学检验》第4版寄生虫学检验第十二章

免疫学诊断技术制作：王建设全国高职高专检验专业教育部卫计委规划教材

《寄生虫学检验》第4版1．掌握：皮内抗原试验、环卵沉淀试验、酶联免疫吸附试验的原理及方法2．熟悉：抗原的制备、斑点金免疫层析试验的原理及方法3．了解：抗原的纯化学习目标全国高职高专检验专业教育部卫计委规划教材

《寄生虫学检验》第4版免疫学诊断技术因简便经济、易自动化操成为寄生虫病实验诊断的重要组成部分但也必须看到，免疫学诊断一般只有辅助诊断价值全国高职高专检验专业教育部卫计委规划教材

《寄生虫学检验》第4版第一节寄生虫抗原的制备及纯化寄生虫的成虫、幼虫、虫卵、囊液和虫体排泄分泌物均可作为抗原材料。其来源可从实验动物、自然感染的保虫宿主或经人工培养获取全国高职高专检验专业教育部卫计委规划教材

《寄生虫学检验》第4版一、抗原制备抗原制备固相抗原制备液相抗原制备虫体抗原排泄分泌物抗原膜抗原全国高职高专检验专业教育部卫计委规划教材

《寄生虫学检验》第4版二、抗原的纯化抗原的纯化盐析法离子交换层析法亲和层析技术DEAE纤维素处理装柱加样第二节常用寄生虫病免疫学诊断技术一、皮内抗原试验寄生虫变应原刺激宿主后，机体产生亲细胞性IgE抗体和IgG4抗体，当将同样抗原注入皮内与抗体结合后，导致肥大细胞和嗜碱性粒细胞脱颗粒，释放出生物活性介质，引起注射抗原部位局部出现红肿属I型变态反应试验，少数也可出现Ⅳ型变态反应全国高职高专检验专业教育部卫计委规划教材

《寄生虫学检验》第4版全国高职高专检验专业教育部卫计委规划教材

《寄生虫学检验》第4版通常是将适宜浓度的无菌皮试抗原0.03ml，注射入消毒后的前臂屈面表皮内层形成皮丘。在邻近处或另一手臂同样注射生理盐水皮丘作为对照，15min后观察结果。如皮丘增大，或有红晕、水肿或伪足样扩展，最长径≥lcm，对照为阴性可判为阳性反应。注射2~4h，甚至72h后出现阳性反应仍有诊断意义全国高职高专检验专业教育部卫计委规划教材

《寄生虫学检验》第4版

皮内抗原试验可应用于多种蠕虫病的诊断及某些螨类所致变态反应的诊断，如血吸虫病、肺吸虫病、肝吸虫病、棘球蚴病、囊虫病、旋毛虫病、肺螨病等的辅助诊断和流行病学调查二、环卵沉淀试验环卵沉淀试验为血吸虫病诊断特有的免疫检测方法血吸虫卵内毛蚴分泌的抗原物质透出卵壳，与患者血清中特异抗体结合后，在虫卵周围形成光镜下可见的沉淀物，即为阳性反应全国高职高专检验专业教育部卫计委规划教材

《寄生虫学检验》第4版全国高职高专检验专业教育部卫计委规划教材

《寄生虫学检验》第4版阳性反应虫卵的百分率称环沉率环沉率(％)=阳性虫卵数/观察的成熟总虫卵数×100全国高职高专检验专业教育部卫计委规划教材

《寄生虫学检验》第4版环卵沉淀反应全国高职高专检验专业教育部卫计委规划教材

《寄生虫学检验》第4版反应强度判断：“-”：虫卵周围光滑无沉淀，或出现直径10μm的泡状沉淀物者为阴性“+”：虫卵周围泡状沉淀物l0μm，累计面积虫卵面积的1／2，或指状沉淀物虫卵长径全国高职高专检验专业教育部卫计委规划教材

《寄生虫学检验》第4版反应强度判断：“++”：虫卵周围泡状沉淀物面积虫卵面积的1/2，或指状沉淀物≥虫卵长径“+++”：虫卵周围泡状沉淀物面积虫卵面积，或细长卷曲状沉淀物≥虫卵长径的2倍全国高职高专检验专业教育部卫计委规划教材

《寄生虫学检验》第4版三、酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验是把待测标本(含有未知抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的顺序与固相抗原或抗体起反应，再洗涤固相载体，随后加入酶的底物，底物受酶催化转变为有色产物，根据颜色的深浅对待测物质定性或定量，结果可用目测或用酶标阅读仪测定OD值全国高职高专检验专业教育部卫计委规划教材

《寄生虫学检验》第4版抗原的纯化斑点ELISA双抗体夹心法间接法竞争抑制法全国高职高专检验专业教育部卫计委规划教材