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几类类天然产物的提取分离方法

几类类天然产物的提取分离方法

本人总结了一些分离方法，以抛砖引玉！

总述

1)提取前文献查阅综述和药材生药鉴定2)提取方法

①粉碎成粗粉

②有机溶剂法和水提法③水蒸气蒸馏法④升华法

3)分离纯化法

①根据物质溶解度的不同进行分离

a.温度不同,溶解度不同b.改变溶液的极性去杂

c.酸碱法

d.沉淀法

②根据物质分配比不同极性分离

a.液-液萃取法

b.反流分布法c.液滴逆流层析法d.高速逆流层析法e.GC法f.LC法:LC分配层析载体主要有---硅胶,硅藻土,纤维素等;有正反相之分;压力有低、中、高之分;载量有分析、制备之分。

③根据物质吸附性不同极性分离

a.※极性吸附剂（如SiO2,Al2O3...)极性强，吸附力大

※非极性吸附剂(如活性炭－对非极性化合物的吸附力强(洗脱时洗脱力随洗脱剂的极性降低而增大)。

b.化合物的极性大小依化合物的官能团的极性大小

而定;

溶剂的极性大小可按其介电常数大小排列

（极性渐大）:

己烷??苯??无水乙醚CHCl3??AcOEt??乙醇??甲醇水e??1.882.294.47??5.206.1126.031.281.0??

c.氢键力吸附??聚酰胺吸附层析--洗脱剂的洗脱力由小到大为:

水甲醇丙酮NaOH液甲酰胺尿素水液

④根据物质分子的大小进行分离

??如葡萄糖凝胶(SephadexGandLH-20...)过泸法等

⑤根据物质解离程度不同的分离法??离子交换法：

??强酸：-SO3H

??强碱：-N+(CH3)3Cl-

弱酸：-CO2H

??弱碱：-NH2(NH,N)

一、糖及苷类的提取和分离

1溶剂处理法

2铅盐沉淀法

3大孔树脂处理法

4柱色谱分离法

二醌类化合物的提取和分离

一提取方法:

一般选用甲醇或乙醇为溶剂，可同时将游离态和成苷的蒽醌类化合物从药材中提取出来，浓缩后再依次用有机溶剂提取（多用索氏提取法），可根据极性大小不同进行初步分离（如将苷和苷元分开）。

（一）柱层析法

分离黄酮类化合物常用的吸附剂或载体有硅胶、聚酰胺及纤维素粉等。此外，也有用氧化铝、氧化镁及硅藻土等。

1.硅胶柱层析：此法应用范围最广，主要适于分离异黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇及高度甲基化（或乙酰化）的黄酮及黄酮醇类。少数情况下，在加水去活化后也可用于分离极性较大的化合物，如多羟基黄酮醇及其甙类等。

2.聚酰胺柱层析：对分离黄酮类化合物来说，聚酰胺是较为理想的吸附剂。其吸附强度主要取决于黄酮类化合物分子中羟基的数目与位置及溶剂与黄酮类化合物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。

聚酰胺柱层析可用于分离各种类型的黄酮类化合物，包括甙及甙元、查耳酮与二氢黄酮等??黄酮类化合物从聚酰胺柱上洗脱时大体有下列规律：

（1）甙元相同，洗脱先后顺序一般是：

参糖甙双糖甙单糖甙甙元

（2）母核上增加羟基，洗脱速度即相应减缓

3）不同类型黄酮化合物，先后流出顺序一般是：异黄酮二氢黄酮醇黄酮黄酮醇

（4）分子中芳香核、共轭双键多者则吸附力强，故查耳酮往往比相应的二氢黄酮难于洗脱。上述规律也适用于黄酮类化合物在聚酰胺薄层上的行为。

3.葡聚糖疑胶(Sephadexgel)柱层析：

对于黄酮类化合物的分离，主要用两种型号的凝胶：Sephadex-G型及Sephadex-LH-20型。

葡聚糖凝胶分离黄酮类化合物的机理是：

分离游离黄酮时，主要靠吸附作用。凝胶对黄酮类化合物的吸附程度取决于游离酚羟基的数目。但分离黄酮甙时，则分子筛的属性起主导作用。在洗脱时，黄酮甙类大体上是按分子量由大到小的顺序流出柱体，

葡聚糖凝胶柱层析中常用的洗脱剂有：

(1)碱性水溶液（如0.1mol/LNH4OH），含盐水溶液(0.5mol/LNaCl等)。

(2)醇及含水醇，如甲醇，甲醇-水（不同比例）、t-丁醇-甲醇(3:1)、乙醇等。

(3)其它溶剂：如含水丙酮、甲醇-氯仿等。（二）梯度pH萃取法梯度pH萃取法适合于酸性强弱不同的黄酮甙元的分离。根据黄酮类甙元酚羟基数目及位置不同其酸性强弱也不同的性质，可以将混合物溶于有机溶剂（如乙醚）后，依次用5%NaHCO3、5%Na2CO3、0.2%NaOH及4%NaOH水溶液萃取，来达到分离的目的。

酸性：7，4￠-二OH7-或4￠-OH

（溶于）：5%NaHCO3液5%Na2CO3液

一般OH5-OH

0.2%NaOH液4%NaOH液）三）根据分子中某些特定官能团进行分离在黄酮类成分的混合物中，具有邻二酚羟基成分与无此结构的成分，可用铅盐法分离。有邻二酚羟基的成分可被醋酸铅沉淀，不具有邻二酚羟基的成分可被碱式醋酸铅沉淀，达到分离的目的。