DB34_T 3401-2019 鹅星状病毒怖控技术规程.docxVIP

ICS?11.220

B?41

DB34

安 徽 省 地 方 标 准

DB?34/T?3401—2019

鹅星状病毒病防控技术规程

Technical?regulations?for?prevention?and?control?of?goose?astrovirus?disease

文稿版次选择

2019?-?11?-?04?发布 2019?-?12?-?04?实施

安徽省市场监督管理局 发?布

DB34/T?3401—2019

前??言

本标准按照?GB/T?1.1-2009?给出的规则起草。

本标准由安徽省农业科学院畜牧兽医研究所提出。

本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：安徽省农业科学院畜牧兽医研究所、合肥市动物疫病预防控制中心、安徽省动物

卫生监督所、含山县畜牧局。

本标准主要起草人：胡晓苗、张丹俊、潘孝成、钱昌银、李雪松、周学利、赵瑞宏、戴银、侯宏艳、

沈学怀、胡业和。

I

DB34/T?3401—2019

鹅星状病毒病防控技术规程

1 范围

本标准规定了鹅星状病毒病的诊断、预防和控制措施。

本标准适用于鹅场鹅星状病毒病的预防和控制。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T?36195 畜禽粪便无害化处理技术规范

NY/T?1167 畜禽场环境质量及卫生控制规范

NY/?T?5030 无公害农产品?兽药使用准则

NY?5032 无公害食品?畜禽饲料和饲料添加剂使用准则

《中华人民共和国动物防疫法》

《病死及病害动物无害化处理技术规范》 农医发〔2017〕25号

3 术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

鹅星状病毒??Goose?astrovirus

鹅星状病毒是一类无囊膜、呈球形、直径为?28～30?nm?的单股正链?RNA?病毒，感染雏鹅后，以

内脏器官及关节腔的严重尿酸盐沉积为主要病理变化特征。

4 诊断

4.1 流行特点

主要感染雏鹅。病鹅、隐性带毒鹅、带毒种蛋是主要传染源。自然感染的潜伏期约?3?天，经蛋感

染的雏鹅最早可在?3?日龄发病，以?5～20?日龄最为常见，死亡率最高可达?90％。初期为急性经过，

急性期过后形成慢性感染或隐形感染。不同品种鹅群均有发生，更换饲料以及减少饲喂量均无效。

4.2 临床症状

患鹅精神沉郁，呆立不动或卧地倦动，采食减少。从发病到死亡最快几小时。一开始拉白色稀粪，

随后转为黄绿色稀粪。发病高峰期约一星期，病程稍长的鹅消瘦，一些小鹅眼球表现出明显的灰白多云

状外观。

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4.3??病理变化

4.3.1??剖检病变

剖检最典型的病理变化为器官的尿酸盐沉积，内脏器官及关节腔的尿酸盐沉积最为严重，气管也能

见环状白色尿酸盐沉积。

4.3.2??组织学病变

患鹅肾小管上皮细胞坏死，肾间质出血，肾小球肿胀，脾脏有大量红细胞浸润，肝细胞空泡变性，

尿酸盐沉积。

4.4??分子生物学诊断

4.4.1??检测病原

使用?RT-PCR?检测病原。采取疑似鹅星状病毒感染鹅的内脏组织，制备模板，再进行?PCR?鉴定。

4.4.2??模板制备

用?Trizol?法和酚氯仿法分别提取患病雏鹅的肝脏、脾脏、胰腺等病变组织或接种鹅胚盲传?3?代

尿囊液的总?RNA，将提取的样本总?RNA?反转录为?cDNA，反转录体系（10.0?μL）如下：

——RNase?Inhibitor?0.5?μL，M-MLV?buffer?2.0?μL，Random?Primers?1.0?μL，dNTPMix?1.0?μL，

RNases?M-MLV?0.5?μL，RNA?模板?5.0?μL。

反应程序为：30℃?10?min，42℃?60?min，70℃?15?min，4℃终止。

注：也可选择市售商品化?RNA?提取试剂盒，完成总?RNA?的提取。

4.4.3??PCR?扩增

——上游引物：5′-TGGTGGTGYTTYCTCAARA-3′；

——下游引物：5′-GYCKGTCATCMCCRTARCA-3′。

以反转录的?cDNA?为模板，进行?PCR?扩增。

反应体系（20uL）：Mix?1.0?μL，ddH2O?6.0?μL，上游引物?1.0?μL，下游引物?1.0?μL，DNA模板

2.0?μL。

反应条件：94℃预变性?5?min，94℃变性?1?min，55℃退火?1?min，72℃延伸?1?min，进行?30?个

循环；72℃延伸?10?min，4℃终止反应。

4.4.4??结果分析与判定

PCR?产物经?1％的琼脂糖凝胶电泳，当阳性对照出现?601bp，扩增带，阴性对照未出现目的条带时，

实验