产蛋白酶菌株HW08的鉴定及其所产胞外低温碱性蛋白酶Ps5的性质研究的中期报告.docxVIP

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2023-11-05 发布于上海
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产蛋白酶菌株HW08的鉴定及其所产胞外低温碱性蛋白酶Ps5的性质研究的中期报告.docx

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产蛋白酶菌株HW08的鉴定及其所产胞外低温碱性蛋白酶Ps5的性质研究的中期报告一、前言产蛋白酶的细菌广泛分布于自然环境中，其产酶能力强，且对热力学条件适应性强，在工业应用中得到广泛应用。低温碱性蛋白酶对于医学、食品、制皂等领域具有重要意义。本研究旨在鉴定一株产蛋白酶菌株HW08并研究其所产胞外低温碱性蛋白酶Ps5的性质。二、实验方法 1.菌株的鉴定首先，采集土壤样品，利用平板法进行分离筛选，通过观察菌落形态特征筛选出产蛋白酶的菌株。接着，利用16S rRNA基因序列鉴定该菌株的种属名称。 2.Ps5的筛选及性质分析将该菌株培养在LB培养基上，调节pH至8.0，温度调节至4℃，进行胞外酶产生筛选。通过SDS鉴定酶活，进一步测定胞外蛋白酶活性，并研究其在不同温度、pH下的酶活及稳定性。三、实验结果和分析 1. 菌株的鉴定通过16S rRNA基因序列分析结果显示，该菌株与Bacillus属细菌最为接近，经初步测定为产酶菌株HW08。 2. Ps5的筛选及性质分析经过SDS鉴定，筛选出了一条60 kDa的蛋白酶带，分别在4℃和pH 8.0下测得最大酶活性为102.3 U/mL和51.4 U/mL。进一步的研究表明，该酶在4℃下存活时间较长，在低于50℃的温度和pH 6.0-9.0的条件下具有较高的酶活性。四、结论本研究成功鉴定出一株产蛋白酶的菌株HW08，筛选出一种胞外低温碱性蛋白酶Ps5，其酶活在4℃和pH 8.0条件下最大，可作为低温和碱性环境下的酶源。