一种无细胞体系全酶法微环DNA的制备方法及其应用.pdfVIP

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2023-10-04 发布于四川
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一种无细胞体系全酶法微环DNA的制备方法及其应用.pdf

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本发明提供了一种无细胞体系全酶法微环DNA的制备方法及其应用，通过构建含有基因治疗表达框架的重组质粒，经过聚合酶体外扩增，在整合酶的作用下分离成微环DNA和骨架载体，然后利用限制性内切酶将骨架载体切除线性DNA，再用核酸外切酶进一步降解掉线性DNA，达到彻底去除骨架载体的目的，从而获得高纯度的微环DNA。本发明采用无细胞体系的全酶法DNA复制体系制备高纯度微环DNA，较细胞内制备方法具有重复性好、纯度高、成本低的优势。

(19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 116837053 A (43)申请公布日 2023.10.03 (21)申请号 202310729480.4 (22)申请日 2023.06.20