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高中生物单克隆抗体知识点 高中生物单克隆抗体基础知识点 一、区别单克隆抗体和多克隆抗体 多克隆抗体：抗原刺激机体，产生免疫学反应，由机体 的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球 蛋白，这就是免疫球蛋白，这种与抗原有特异性结合能力的 免疫球蛋白就是抗体。 当病原体入侵人体，能够刺激机体免疫系统产生大量的 多种抗体，那么这一堆抗体就是多克隆的。 单克隆抗体 (MAb)：是针专一的抗原决定簇产生的抗体， 单克隆技术又名杂交瘤技术，起源于 1975 年，由 G.KOuml;hler 和 Milstein 创立。主要原理是利用产生抗体 的 B 细胞与肿瘤细胞杂交融合成杂交瘤细胞，生产抗体。 此类抗体是专一的，或者说是同一种蛋白质，因此是单 克隆的。 二、杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要步骤 (1)抗原制备; (2)免疫动物; (3)免疫脾细胞和骨髓瘤细胞的制备; (4)细胞融合; (5)杂交瘤细胞的选择培养; 第 1 页 (6)杂交瘤细胞的筛选; (7)杂交瘤细胞的克隆化; (8)单克隆抗体的检定; (9)分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立; (10)单克隆抗体的大量制备。 三、杂交瘤技术制备单克隆抗体的具体过程 1、免疫动物 免疫动物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠 产生致敏 B 淋巴细胞的 过程。 一般选用 6-8 周龄雌性 Balb/c 小鼠，按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。 抗 原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官，刺激相应 B 淋巴细胞克隆，使其活化、增殖，并分化成为致敏 B 淋巴细 胞。 2、细胞融合 采用眼球摘除放血法处死小鼠，无菌操作 取出脾脏，在平皿内挤压研磨，制备脾细胞悬液。 将准备 好的同系骨髓瘤细胞与小鼠脾细胞按一定比例混合，并加入 促融合剂聚乙二醇。在聚乙二醇作用下，各种淋巴细胞可与 骨髓瘤细胞发生融合，形成杂交瘤细胞。 3、选择性培养 选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤 细胞，一般采用 HAT 选择性培养基。在HAT 培养基中，未融 合的骨髓瘤细胞因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶， 不能利用补救途径合成 DNA 而死亡。 未融合的淋巴细胞虽 具有次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶，但其本身不能在体 第 2 页 外长期存活也逐渐死亡。 只有融合的杂交瘤细胞由于从脾 细胞获得了次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶，并具有骨髓瘤 细胞能无限增殖的特性，因此能在HAT 培养基中存活和增殖。 高中生物易错知识点 ●使能量持续高效的流向对人类最有意义的部分 ●能量在 2 个营养级上传递效率在 10%—20% ●单向流动逐级递减 ●真菌 PH5.0—6.0 细菌PH6.5—7.5 放线菌 PH7.5—8.5 ●物质作为能量的载体使能量沿食物链食物网流动 ●物质可以循环，能量不可以循环 ●河流受污染后，能够通过物理沉降化学分解 微生物 分解，很快消除污染 ●生态系统的结构：生态系统的成分+食物链食物网 ●淋巴因子的成分是糖蛋白、病毒衣壳的是 1—6 多肽 分子个、原核细胞的细胞壁：肽聚糖 ●过敏：抗体吸附在皮肤，黏膜，血液中的某些细胞表 面，再次进入人体后使细胞释放组织胺等物质. ●生产者所固定的太阳能总量为流入该食物链的总能 量 第 3 页 ●效应 B 细胞没有识别功能 ●萌发时吸水多少看蛋白质多少、大豆油根瘤菌不用氮 肥、脱氨基主要在肝脏但也可以在其他细胞内进行 ●水肿：组织液浓度高于血液 ●尿素是有机物，氨基酸完全氧化分解时产生有机物 ●是否需要转氨基是看身体需不需要 ●蓝藻：原核生物，无质粒、酵母菌：真核生物，有质 粒、高尔基体合成纤维素等 ●生物导弹是单克隆抗体是蛋白质 ●淋巴因子：白细胞介素 ●原肠胚的形成与囊胚的分裂和分化有关