BD流式抗体常见问题 .pdfVIP

优宁维，您身边的抗体专家！ Q、是否能涡旋震荡抗体或重组蛋白？ A：我们不推荐震荡蛋白或抗体溶液，这会改变产品的特性。通常在运输过程中，液体有可能已经分散在管子中。 推荐使用之前，瞬时离心，这样抗体会沉到管底，以达到标示的体积。 Q.、我能涡旋震荡已经标记了抗体的细胞样品吗？ A：可以，短时震荡能保持细胞的最佳状态。 Q、不能马上检测的样品，我该如何保存？ A：首先，要获得最好的效果，一定是推荐立即上机检测。要保存染色完成的样品，可以在ICFixationBuffer(cat. (100μL样品混合100μLICFixationBuffer)或者 1-stepFix/LyseSolution(cat.00-5333)中固定保存，暗处4°C最 长可以保存3天。对于tandem染料，如 APC-eFluor?780,PE-Cy7等，eBioscience的数据显示不会增加它们与APC 或者PE的补偿。某些影响可能与克隆号有关。 Q、我可以用自己配制的固定缓冲液来保存细胞吗？ A：我们不推荐使用其他缓冲液，我们只能确保ICFixationBuffer(cat.00-8222)或者 1-stepFix/LyseSolution(cat. 00-5333)的保存效果。 Q、有文献提到与DEC205+cells存在不兼容的情况，我能选择哪些其他的标记呢？ A：其实CD205已被证实可以与PE-Cy5.5标记抗体和链霉亲和素标记物结合 (Partetal.2012J.ImmunolMethods 384:184-90);然而，不能用于CD205+的树突状细胞。我们推荐使用 PerCP-Cy5.5标记来替代。 Q、BD公司提供了哪些抗体？ A：物种——人、小鼠、大鼠、非人灵长类、犬类等。 检测指标——包括细胞表面标记 （CD分子，膜骨架，趋化因子受体）和胞内指标 （细胞因子，核内转录因子）。 抗体标记——生物素标记抗体，亲和纯化抗体以及直标荧光素抗体。 BD抗体的直标荧光素有 （括号内是发射光波长）： 紫光（405nm）激发： BV系列 蓝光（488nm）激发：FITC(518nm)、AlexaFluor488(519nm)® 、PE(575nm)、PerCP-eFluor610(610nm)、PE-Cy5(667nm)、 PerCP-Cy5.5(695nm)、PerCP-eFluor710(710nm)、®PE-Cy7(785nm)、BB系列 黄绿光（532-561nm）激发：PE(575nm)、PE-Cy5(667nm)、PE-Cy7(785nm) 红光（633nm）激发：APC(660nm)、eFluor660(660nm)® 、AlexaFluor647(668nm)® 、AlexaFluor700(723nm)® 、 APC-eFluor780(780nm)® Q、BD抗体的保存期限？ A：请见试剂瓶包装上的标注，具体有效期和产品标记荧光素相关 Q、eBioscience抗体交叉反应性 A：ebioscience公司测试了抗体与非人灵长类及猪、犬类的交叉反应性。 抗人抗体的交叉反应性请见网页 抗小鼠抗体的交叉反应性 欢迎登陆优宁维官网 免费服务热线：4006-365-264 优宁维，您身边的抗体专家！ Q、亲和纯化抗体与功能性抗体的区别？ A：BD提供的亲和纯化抗体含有叠氮化钠，这些产品主要用于flowcytometry,WB,IP,andIHC实验；功能级抗体则 不含有叠氮化钠，而且进行了内毒素检测，这些抗体的内毒素含量低于0.01ng内毒素/ug抗体蛋白。功能性抗体一 般用于体外功能实验，如刺激、阻断、中和。 Q、BD公司提供抗体浓度是多大？ A：BD公司的提供抗体包括两种规格：ug和test包装. 在ug规格的抗体中，亲和纯化、生物素标记、功能纯化生物素标以及FITC和AlexaFluor®488标记的抗体浓度一般 为0.5mg/ml；APC、PE、AlexaFluor®647,700和tandem标记的抗体浓度一般为0.2mg/ml；功能纯化抗体浓度一般 为1mg/ml；具体以抗体标识为准。 tests规格的抗体浓度标注在说明上。 Q、BD抗体可以应用于哪些实验 A：具体单个抗体的应用请见说明书 1.Flowcytom