FXYD5基因真核表达载体的构建及其功能的初步研究的中期报告.docxVIP

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2023-08-25 发布于上海
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FXYD5基因真核表达载体的构建及其功能的初步研究的中期报告.docx

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FXYD5基因真核表达载体的构建及其功能的初步研究的中期报告中期报告内容：一、研究背景 FXYD5是一种ATP酶类似物，通过调控Na+/K+-ATP酶的活性影响心脏肌细胞的电生理活动、心肌收缩能力和离子稳态，与心肌病、心衰等心血管疾病的发生密切相关。因此，研究FXYD5的表达、结构和功能对于心血管疾病的预防和治疗具有重要意义。二、研究目的本研究旨在构建FXYD5基因真核表达载体并表达目的蛋白，从而研究FXYD5的功能及其对心肌病、心衰等心血管疾病的作用机制。三、研究内容 1.构建FXYD5基因真核表达载体本研究参考已有文献和序列数据库，设计了适合目的蛋白表达的真核载体，包括启动子、5’UTR、ORF、3’UTR和下游终止信号。接着，通过PCR扩增FXYD5基因，克隆至真核载体上，并进行酶切和连接，构建成功的载体经测序验证。 2.将载体转染入293T细胞中并表达蛋白将FXYD5基因真核表达载体转染至293T细胞中，利用Western blotting检测目的蛋白表达情况，初步验证了构建的FXYD5基因真核表达载体的可行性，为后面进一步研究提供了基础。四、研究进展和计划本中期报告的研究已初步验证了FXYD5基因真核表达载体的构建可行性，并成功表达了目的蛋白，研究进展顺利。下一步，我们将进一步验证FXYD5基因真核表达载体转染cell line的稳定性，并进行蛋白的纯化和鉴定。同时，将建立小鼠心肌细胞模型，探究FXYD5与心肌细胞功能及离子平衡的关系。我们相信，这些工作的顺利开展将为FXYD5在心血管疾病治疗中的应用提供理论和实验基础。