SN 1502-2005国境口岸拉沙热检验规则.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1502-2005国境口岸拉沙热检验规程Examination codes for Lassa fever at frontier port2005-02-17 发布2005-07-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 1502—2005前言本标准的附录 C、附录 D为规范性附录,附录 A、附录 B为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局。本标准主要起草人：何晨光、刘德宝、王馨、祁军、柴宏森、刘振宇。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 SN/T 1502--2005国境口岸拉沙热检验规程1 范围本标准规定了国境口岸拉沙热的检验对象、检验方法、检验结果报告，及阳性结果的处置方法。本标准适用于国境口岸拉沙热的检验。2 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。2. 1拉沙热 Lassa fever由拉沙热病毒引起的一种急性传染病，其传染性极强，可通过直接接触而传播，也可通过气溶胶传播。本病起病急，临床表现严重、病死率高,对人类的生命和健康危害很大。3 对象国境口岸拉沙热的检验对象包括：一一拉沙热爆发期间来自爆发地且未超过潜伏期的所有人员；一来自拉沙热疫区具有拉沙热临床症状的病人，4标本的采集和处理4.1标本的采集4.1.1 病人血清病人第一份血液标本为发病后 3 d 内的急性期标本,第二份为发病 2 周或 4～8 周的恢复期标本。标本采集后在冷藏条件下迅速送P4实验室，立即分离血清。若不能即刻做细胞培养，该标本应置于超低温冰箱一80℃或液氮罐内保存。4. 1.2 病人体液、排泄物采集发病 3 d～4 d病人的咽部嗽液、胸腔积液和尿液等在冷藏条件下迅速送至 P4实验室，进行病毒分离培养和其他检测。4. 2 标本的标识采集的标本应进行标识，连同相关记录一并送实验室。4.3实验样品转运实验样品的转运应注意下列事项：所有需要转运的实验样品必须标明“传染性物质，拉沙热病毒”；短途运输必须使用专车，由专人运送。尽可能避免长途转运，如确需要空运的实验样品应按照传染性物品运输的规定办理；样品的容器要使用能够承受不少于95kPa压力的高质量的防水包装材料并且密封，以防止运输过程中发生内容物的外泄；-第二层和第三层包装中应使用吸水性好的柔软物质充填；一几个易碎的容器在同一个包裹中运输时，应分别独立包装并相互隔离，以免相互碰撞。1 SN/T 1502—20055 准备实验室常用设备和器材参见附录A，常用溶液及配制参见附录B。6实验室检验国境口岸拉沙热实验室检验内容如下：抗体检测；一病毒分离鉴定;-抗原检测;一-核酸分子检测。具体检验方法见附录C。7生物安全措施拉沙热实验室的生物安全及防护措施按照附录D的要求执行。8检验结果报告8.1单份血清检测单份血清标本特异性抗体1：400以上，报告为“拉沙热病毒抗体阳性”，单份血清标本病毒抗原1：16以上，报告为“拉沙热病毒抗原阳性”,结合临床表现具有诊断意义。8.2双份血清检测患者双份血清特异性抗体检测，恢复期血清抗体效价较急性期增高4倍及以上时，报告为“拉沙热病毒抗体阳性”。8.3间接免疫荧光试验单份血清标本1：50稀释呈阳性或双份血清效价增高4倍以上时，报告经间接免疫荧光试验证实为“拉沙热病毒抗体阳性”。8.4病毒分离鉴定将含病毒材料接种细胞培养，出现明显细胞病变，并经间接免疫荧光法(IFA)鉴定证实，报告为“检出拉沙热病毒”。8.5 病毒核酸分子检测用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法从中检测到拉沙热病毒特异性 NP或GP1 或 GP2 基因,报告为检出拉沙热病毒特异性 NP基因”。8.6免疫印迹试验膜条上有均一色点，报告经免疫印迹试验确认为“拉沙热病毒抗体阳性”。9阳性结果的处置对病毒分离株及其他阳性结果的相应标本应送有资质的实验室做复检或鉴定。阳性结果应及时向上级主管部门报告。2 SN/T 1502—2005附录A(资料性附录)实验室检验设备与器材A.1实验设备按照国际标准建设，并经有关部门组织专家全面验收合格的生物安全防护 4级(BLS-4 或 P4)实验室和相应的配套设施，以及严格的工作规章制度。A.2 主要仪器A.2.1落射式荧光显微镜。A.2.2低温超速离心机（100000g）。A.2.3超低温冰箱（一80C)、液氮储存罐。A.2.4-射线照射装置。A.2.5 PCR 检测仪。A.2.6双门高压灭菌器、熏蒸消毒柜。A.2.7电泳仪、垂直平板电泳槽、转移电泳槽、透射反射仪等。A.3细胞培养用器材A. 3. 1一次性无菌有盖塑料细胞培养瓶（25cm²）。A.3.237℃恒温培养箱（内置细胞瓶旋动培养装置）。A.3.3全排式生物安全柜。A.3.4负