SNT 2309-2009进出口乳及乳制品中四环素类药物残留检测方法 放射受体分析法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2309—2009进出口乳及乳制品中四环素类药物残留检测方法放射受体分析法Determination of tetracyclines residues in milk and diary productsfor import and export--Radio-receptor method2009-07-07发布2010-01-16实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准进出口乳及乳制品中四环素类药物残留检测方法：放射受体分析法SN/T 2309—2009中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045网址 www. 电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷广印刷*开本 880×12301/16　印张 1　字数 21千字2009年11月第一版　2009年11月第一次印刷印数 1—2 000*书号：155066·2-20005 SN/T 2309—2009前言本标准的附录 A为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国广东出人境检验检疫局。本标准主要起草人：陆勤、林峰、张美金、孙良娟、李红权。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 2309—2009进出口乳及乳制品中四环素类药物残留检测方法放射受体分析法1 范围本标准规定了进出口乳及乳制品中四环素类药物残留测定的制样和放射受体分析方法。本标准适用于鲜奶、奶粉、乳清粉中四环素、土霉素、金霉素、强力霉素药物残留的筛选检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3试样制备和保存3.1试样制备从混合原始样品中取出部分代表性样品，奶粉、乳清粉不少于500g，鲜奶不少于500mL，均分两份，装人洁净容器内作为试样，加封并标明标记。制样过程中应防止样品受到微生物或化学物的污染或发生残留物含量的变化。3.2试样保存干粉样品室温密封保存,液体样品0℃～4℃冷藏可保存5d，一15℃以下冷冻可保存2个月。4检测方法4.1方法提要测定的基础是竞争性受体免疫反应。当样品中含有四环素类抗生素时，样品中四环素类抗生素残留物与受体上的结合位点结合，从而阻止了[3H标记的四环素与受体试剂位点的结合。样品中的四环素类药物含量越高，竞争的结合位点越多，HI标记的四环素结合的则越少，用液体闪烁计数仪测定样品中[H]含量的cpm值（count per minute，即每分钟脉冲数)越低。样品中四环素类抗生素残留量与cpm值成反比。4.2 试剂与材料除非另有说明，所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。4.2.1牛奶中的四环素类抗生素 Charm Ⅱ放射免疫试剂盒(MRLs Competitive Assay)1):药片标识为 T。受体试剂药片：于一15℃以下冷冻保存。［HI标记的四环素药片：于一15℃以下冷冻保存。4.2.2阴性对照奶粉：被证实不含抗生素的奶粉。4.2.3土霉素标准品。4.2.4闪烁液。1）Charm ⅡI牛奶中四环素类抗生素竞争性受体结合测试试剂盒是由Charm公司提供产品的商品名称。给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 SN/T 2309--20094.2.5硅硼酸盐玻璃试管及试管塞。4.2.6具塞塑料离心管,50 mL。4.2.7至药片压杆。4.3仪器和设备液体闪烁计数仪：Charm Ⅱ 7600分析仪。4.3.1分析天平：感量为0.01g和0.1mg。.3离心机：大于3 400 r/min。4.3.4涡旋混合器。恒温加热器：80℃±2℃,35℃±1℃。4.3.5微量移液器: 20 μL~100μz200μl1.000μl1000mμl~5 000 μL。4.3.65·检测步骤5.1阴性对照和阳性对照溶液的准备5.1.1阴性对照溶液的配制：取试剂盒中阴性对照奶粉(4.2.2)药13g加40℃温水100mL溶解，放置在0℃～4℃冰浴中待测。5.1.2阳性对照溶液的配制：在阴性对照溶液(5.1.1)中加入土霉素标准品，溶解后的阳性对照液中含30 μg/L的土霉素。放置在 0℃~4 ℃冰浴中待测5.2样品前处理5.2.1液态奶：取20mL牛奶↓3.400r/min离心5min,除去上层脂肪层。冰浴至0℃～4℃待测。5.2.2奶粉、乳清粉：称取4.