SNT 1777.3-2008动物源性食品中大环内酯类抗生素残留检测方法 第3部分：微生物抑制法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1777.3-2008动物源食品中大环内酯类抗生素残留检测方法第3部分：微生物抑制法Determination of macrolide residues in animal-origin food-Part 3 : Microbial inhibition method2008-09-16 发布2009-03-16 实施中华人民共和国ox发布染后拔指荐 童谢真优国家质量监督检验检疫总局数码防伪 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准动物源食品中大环内酯类抗生素残留检测方法第3部分：微生物抑制法SN/T 1777. 3--2008中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045网址 www. spc. net. cn电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本 880×12301/16印张 1.25字数 32千字2008年11月第一版　2008年11月第一次印刷印数 1--2 000书号：155066·2-19235 SN/T 1777.3—2008前言本部分的附录 A为规范性附录，附录 B为资料性附录。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局。本部分主要起草人：王敏、顾鸣、郭德华、杨捷琳、韩丽、邓晓军、杨惠琴、陈墨莲。本部分系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 1777.3--2008动物源食品中大环内酯类抗生素残留检测方法　第 3部分：微生物抑制法1 范围SN/T1777的本部分规定了动物源食品中大环内酯类兽药残留检测的试样制备、保存和微生物抑制检测方法。本部分适用于肉类、水产品、动物内脏、鸡蛋和牛奶中大环内酯类鲁药筛选检测，阳性结果应用其他方法进行确证。2规范性引用文件下列文件中的条款通过SN/T1777的本部分的号用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本部分。GB/T6682　分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682-2008,ISO.3696:1987,MOD)3试样制备和保存3.1试样制备3.1.1牛奶：取不少于500mL试样，装人清洁容器内，进行标记。3.1.2肉类、水产品、动物内脏：从原始样品中取出部分有代表性样品，将可食部分放人高速组织捣碎机均质，充分混匀，用四分法缩分不少于500g试棒。装入清洁容器内，进行标记。3.1.3蛋：从原始样品中，随机分出一半（不少于500g），鲜蛋需去壳，进行标记。注：制样操作过程中，应防止样品到污染或发生残留物含量的变化。3.2试样保存3.2.1 牛奶:0℃～4℃保存。3.2.2肉类、水产品、动物内脏和蛋：试样于一18℃以下保荐4　测定方法4.1方法提要试样经压榨得到样液,样液加到含有一定数量的嗜热脂肪芽孢杆菌培养基中,64℃培养 3 h～4 h。利用抗生素对敏感菌的抑制作用来判别试样中是否含有抗生素。4.2设备和材料4.2.1恒温箱：64℃±1℃。4.2.2离心机。4.2.3高速组织捣碎机。4.2.4均质器。4.2.5恒温水浴锅：80℃。涡旋振荡器。.7肉类榨汁器。 SN/T 1777.3—20084.2.8克氏瓶。4.2.9安。4.2.10可调移液器:10 μL～100 μL,100 μL～1 000 μL。4.3菌种和培养基4.3.1菌种 嗜热脂肪芽孢杆菌 Bacillus stearothermophilus var.calidolactis ATCC10149。4.3.2培养基细菌保存及传代培养基：见附录A第A.1章。增菌固体培养基：见附录A第A.2章。检定培养基：见附录 A第 A.3章。4.4试剂本标准所用化学试剂为分析纯，试验用水为蒸馏水、去离子水，试验用水应符合GB/T6682的规定。4.4.1指示剂:溴甲酚紫，制法见附录 A.3.2。4.4.2甲醇。4.4.3标准溶液：标准物质泰乐菌素：纯度≥98%。泰乐菌素标准储备液：100 μg/mL。称取标准物质泰乐菌素10.0 mg（精确至0.1 mg），用甲醇溶解并定容至100mL，得到终浓度为100μg/mL的泰乐菌素标准储备液，置2℃～8℃冰箱中保存，可使用1个月。泰乐菌素标准工作液：0.05 μg/mL。吸取一定量的泰乐菌素标准储备液，用甲醇稀释成0.05μg/mL的泰乐菌素标准工作液，置 2℃～8℃冰箱中保存,可使用1周。4.5测定步骤4.5.1样液制备肉类、水产品、动物内脏：用肉类榨汁器榨汁，取大约250μL汁液作为待测样液。蛋：取禽蛋液体至清洁容器中,均质后直接取