SNT 2497.1-2010进出口危险化学品安全试验方法 第1部分：体内哺乳动物肝细胞程序外DNA合成（UDS）试验.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2497. 1--2010进出口危险化学品安全试验方法第1部分：体内哺乳动物肝细胞程序外DNA合成（UDS)试验Test method of import and export dangerous chemicals-Part 1 : Unscheduled DNA synthesis (UDS)test with mammalian liver cells in vivo2010-09-16 实施2010-03-02发布0中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局数码防伪 SN/T 2497. 1—2010前 言SN/T2497《进出口危险化学品安全试验方法》系列标准共分为29部分：-第1部分：体内哺乳动物肝细胞程序外DNA合成(UDS)试验；第2部分：空斑形成细胞(PFC)试验；第3部分：大型繁殖试验；第 4部分：酿酒酵母有丝分裂重组试验;第5部分：睾丸细胞UDS试验；第6部分：哺乳类动物细胞姐妹染色单体互换体外试验；第7部分：小鼠耳肿胀试验；第8部分：胭窝淋巴结试验；第 9部分：血清溶血素测定试验;第10 部分：T淋巴细胞增殖功能测定试验;第11部分：种系突变试验；第12部分：单细胞凝胶电泳分析试验；第13部分：荧光原位杂交试验；第14部分：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳试验：第15部分：PCR-SSCP实验；第16部分：Western-Blot 实验；第17部分：哺乳动物行为毒理学试验；第18部分：DNA加合物的检测方法；第19部分:Northern Blot 实验;第20部分：Bradford法测定蛋白质含量；第21部分：琼脂糖凝胶电泳试验；第22部分：DNA的Tm值测定方法；第23部分：细胞器的分离实验方法;第24部分：细胞免疫功能体外检测方法；第25部分：体液免疫功能试验；第26部分：巨噬细胞功能试验；第27部分：流式细胞术检测凋亡;第28部分：穿梭质粒在突变检验中的应用；第29部分：生化需氧量(BOD)测定。本部分为SN/T 2497的第1部分。本部分修改采用经济合作与发展组织（OECD)化学品测试指南NO.486(1997)《体内哺乳动物肝细胞程序外DNA合成（UDS)试验》，其有关技术内容与上述方法完全一致，在标准文本格式上按GB/T1.1—2000做了编辑性修改。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分负责起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局、中华人民共和国湖南出人境检验检疫局。本部分主要起草人：贾晓川、王利兵、李宁涛、张园、赵青、熊中强。本部分系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 2497.1—2010进出口危险化学品安全试验方法第1部分：体内哺乳动物肝细胞程序外DNA合成（UDS)试验１范围SN/T 2497的本部分规定了进出,口危险化学品体内哺乳动物肝细胞程序外DNA合成(UDS)试验的术语和定义、试验原理、试验程序和试验结果。本部分适用于进出口危险化学品体内哺乳动物肝细胞程序外:DNA合成(UDS)试验检测。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过SN/T2497的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本部分。OECD486体内哺乳动物肝细胞程序外DNA合成(UDS)试验3术语和定义OECD486确立的以及下列术语和定义适用本部分。3. 1净核银粒net nuclear graihs,NNG在放射自显影UDS试验中细胞内/UDS 活性的定量测定，计算为核银粒数(NG)减去等于核面积的细胞质内银粒平均数(CG)，即NNG:NG-CG:“由各细胞计算 NNG数，再将一个培养物或平行培养物中的细胞 NNG汇总。3.2cells in repai正修复的细胞净核银粒(NNG)高于本试验室历史性阴性对照值的细胞3.3程序外 DNA 合成unscheduled DNA synthesis,UDS在切除含有由化学物质或物理因素引起损害的一段DNA后，进行的 DNA 修复合成。4试验原理体内哺乳动物肝细胞程序外DNA合成(UDS)试验的目的是为了鉴定能诱发染毒动物肝细胞DNA修复的物质。体内试验提供了一种研究化学物质肝脏遗传毒性效应的方法，测试的终点表明肝细胞发生DNA损伤及随后发生的修复。肝脏是机体吸收的化学物质代谢的主要器官，因此肝脏是检测体内DNA损伤的适宜部位。化学或物理因素诱发 DNA损伤后，细胞启动程序外 DNA 合成程序以切除或移除 DNA 损伤的区域，体内哺乳动物肝细胞UDS试验就是检测受损DNA的修复合成过程。肝细胞周期中处于 S期频率1 SN