SBT 10320-1999熟料N型蛋白试验.pdf

备案号：2747-1999中华人民共和国行业标准SB/T 10820-1899熟料N型蛋白试验 代替ZB X 66033—87Detection of N-type protein本方法适用于酿造酱油半成品熟料中N型蛋白的测定。用 N 型试验可衡量原料中蛋白质蒸熟程度，评判蒸料的质量。1仲裁法1.1设备与消化率测定法同SB/T10319-1999。1.2试剂及溶液1.2.1 酶液：与消化率测定法同SB/T 10319-1999。1.2.2pH7.2磷酸盐缓冲液：与消化率测定法同，见SB/T10319-1999，1.2.3氯化钠：分析纯。1.3操作1.3.1熟料浆制备：与消化率测定法SB/T10319-1999。1.3.2水解：精确称取熟料浆6g左右（精确到0.2mg）于150mL锥形瓶中，再加入酶液75mL，氯化钠20g，pH7.2缓冲液20mL摇匀，在瓶口塞上橡皮塞后，置于恒温水浴锅中，45℃保温24h（或48h).1.3.3过滤：水解结束后，过滤或离心分离。清液在沸水浴中加热至90℃，用冷水急速冷却，再过滤或离心分离。1.3.4比色：吸取上述清液2mL于试管中，再加入蒸馏水10mL，把试管置沸水浴中加热5min，立刻在冷水中急速冷却。试管中出现混浊或沉淀，N型为阳性。若要定量分析，可用浊度计或比色计测定，并用未煮沸的上清液作空白对照。2近似法2.1设备及试剂：和仲裁法相同。2.2操作2.2.1熟料浆制备：与消化率测定法同SB/T10319-1999，。2.2.2水解：与消化率测定法同.SB/T10319-1999。国家国内贸易局1999-04-15批准1999-04-15实施239 SB/T 10320-19992.2.3加盐：N型试验可和消化率测定同时做。水解结束后，在锥形瓶中加入氯化钠20g，摇匀，使氯化钠溶解。冷却后定容至100mL，过滤或离心分离后，用于消化率测定(SB/T10319-1999l2.2.4过滤：把余下的约一半水解液振摇20min，再过滤或离心分离。清液在沸水浴中加热至90℃，再用冷水急速冷却，再过滤或离心分离。2.2.5吸取第二次过滤或离心的清液2mL于试管中，再加入蒸馏水10mL，置试管于沸水浴中加热5min，立刻在冷水中急速冷却。试管中出现混浊或沉淀，N型为阳性。附加说明：本标准由国家国内贸易局提出。本标准由上海市酿造科学研究所起草。本标准主要起草人须凤高。240