SNT 1692.1-2006非洲马瘟琼脂免疫扩散试验操作规程.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1692.1—2006非洲马瘟琼脂免疫扩散试验操作规程Protocol of agar-gel immunodiffusion test for African horse sickness2006-08-16 实施2006-01-26 发布uy中华人民共和国节克变发布“”数码防伪国家质量监督检验检疫总局 SN/T 1692.1—2006言前本部分参照世界动物卫生组织(OIE)的《陆生动物疾病诊断和疫苗手册》制定。SN/T1692分为三部分：-非洲马瘟琼脂免疫扩散试验操作规程；一非洲马瘟血球凝集和血球凝集抑制试验操作规程；-非洲马瘟补体结合试验操作规程。本部分为SN/T1692的第1部分。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口，本部分起草单位：中华人民共和国云南出人境检验检疫局。本部分主要起草人：杨晶焰、徐自忠、陈建军、龙忠保。本部分系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 1692.1—2006非洲马瘟琼脂免疫扩散试验操作规程范围1SN/T1692的本部分规定了非洲马瘟琼脂免疫扩散试验的操作规程。本部分适用于非洲马瘟琼扩抗体的检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过SN/T1692的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本部分。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3试剂和材料3.1抗原：非洲马瘟组织培养抗原。3.2 非洲马瘟阳性血清。3.3 平Ⅲ。3.4微量移液器。3.5微量滴头。3.6　三角烧瓶。3.73琼脂糖。3.8氯化钠：分析纯。3.9叠氮钠：分析纯。3.10水：符合GB/T6682分析实验室二级水规格。4操作步骤4.1琼脂凝胶平板的制备称取琼脂糖1.2g，氰化钠1.0g，加人100mL.水，经68.94kPa、10min高压或煮沸溶解后，冷却至45℃,加人0.01g叠氮钠。每个平皿加融化琼脂，使琼脂板厚度为2.5mm~～2.8mm,待凝固后倒置，放4℃冰箱15 min。4.2 打孔中间1孔，周围6孔为一组。孔径4mm,孔间距2.4mm。用针挑出或吸出孔内琼脂。4.3加样中心孔加抗原，1、3、5孔加标准阳性血清；2、4、6孔加被检血清。加样量以孔平为准，加样后置湿盒内于室温(22℃～25℃)反应，每次试验设阳性对照。5 判定5.124 h初判,72 h 终判。当阳性对照成立时,进行判定。阳性：被检血清孔与抗原孔之间出现致密的沉淀线，并与标准阳性血清的沉淀线末端呈平滑相连者。1 SN/T 1692.1—2006弱阳性：标准阳性血清孔和抗原孔之间的沉淀线向被检血清孔内侧弯曲,而被检血清孔与抗原之间未形成完整的沉淀线。可疑：标准阳性血清孔与抗原孔之间出现的沉淀线末端向被检血清孔内侧偏弯或微弯者。阴性：抗原孔与被检血清孔之间不出现沉淀线或标准阳性血清与抗原孔间的沉淀线向毗邻的被检血清孔直伸或向其外侧偏弯者。非特异性沉淀线：当抗原和被检血清孔之间出现的沉淀线与标阳性血清的沉淀线交叉，为非特异性反应,应判为阴性。5.2第一次检查为弱阳性、可疑或非特异性沉淀线的样品，需重复试验。如重复试验结果仍为弱阳性、可疑,均终判为阳性;结果仍为非特异性反应,终判为阴性。2 9002-1269L, NS中华人民共和国出人境检验检疫行业标准非洲马瘟琼脂免疫扩散试验操作规程SN/T 1692. 1--2006*中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045网址 电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本 880×12301/16印张0.5字数 4千字2006年4月第一版　2006年4月第一次印刷印数 1—2 000SN/T 1692. 1-2006