SN_T 3538-2013出口食品中六种合成甜味剂的检测方法 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3538-—2013出口食品中六种合成甜味剂的检测方法液相色谱-质谱/质谱法Determination of six kinds of artificial sweeteners infoodstuffs for export--LC-MS/MS method2013-03-01发布2013-09-16实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局刮涂层查真伪 SN/T 3538-2013前言本标准按照GB/T1.1--2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国湖南出人境检验检疫局。本标准主要起草人：张莹、王美玲、易征璇、丁利、易真、蔡婧怡、张帆。 SN/T 3538—2013出口食品中六种合成甜味剂的检测方法液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了出口食品中甜蜜素、糖精钠、安赛蜜、阿斯巴甜、阿力甜、纽甜6种人工合成甜味剂检测的液相色谱-质谱/质谱测定和确证方法。本标准适用于奶粉、液态奶、酸奶、奶油、奶酪、冰激凌、红酒、果汁、糕点、蜜饯、甜酸头中甜蜜素、糖精钠、安赛蜜、阿斯巴甜、阿力甜、纽甜的测定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要试样中人工合成甜味剂采用甲酸-三乙胺缓冲液（pH二4.5)提取，HLB固相萃取小柱净化或用甲醇-水(1十1，体积比)提取后稀释进样，液相色谱-质谱/质谱测定，外标法定量。4试剂和材料除特殊注明外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682 规定的一级水。4.1乙腈:液相色谱级。4.2甲醇:液相色谱级。4.3甲酸。4.4甲酸铵。4.5 三乙胺。4.6亚铁氰化钾。4.7 乙酸锌。4.8 三氯甲烷(氯仿)。4.910%亚铁氰化钾溶液：10g亚铁氰化钾溶解于100 mL水中。4.1020%乙酸锌溶液:20 g乙酸锌溶解于100 mL水中。4.11 0.1%甲酸-5 mmol/L 甲酸铵溶液:取1 mL 甲酸、0.315 g甲酸铵,用水稀释并定容至 1 000 mL。4.12 甲酸-三乙胺缓冲溶液（pH=4.5)：取 0.8 mL 甲酸、2.5 mL 三乙胺，用水稀释并定容至1 000 mL.4.13甲醇-水(1+1,体积比)：量取100mL甲醇，加入100 mL水，混匀备用。4.14甜蜜素、糖精钠、安赛蜜、阿斯巴甜、阿力甜、纽甜标准物质：纯度≥95%，基本信息参见附录 A。4. 157标准贮备液：准确称取适量的4.14中的标准物质，用甲醇-水（1十1，体积比）分别配制成质量浓1 SN/T 3538—2013度为1.0mg/mL的标准储备溶液，一18℃下避光保存，可稳定12个月以上。4.16混合标准中间溶液：取4.15中的标准贮备液适量，用甲醇-水（1十1，体积比）配制成10μg/mL的标准混合溶液，4℃下避光保存，可稳定3个月以上。4.17标准工作溶液的配制：吸取适量的4.16中的混合标准中间溶液，用空白样品基质配制成适当浓度的混合标准工作溶液，使用前配制。4.18固相萃取小柱：Waters oasis HLB固相萃取小柱,6 mL,600 mg 或相当者。4.19²海砂:化学纯,粒度 0.65 mm～0.85 mm。5仪器和设备5.1高效液相色谱-质谱/质谱仪：配电喷雾离子源(ESI)。5.2分析天平：感量为0.01g和l000１g。5.3涡旋混匀器。5.4高速离心机（最大转速10 000r/min）。5.5氮气吹干仪。5.6固相萃取装置。5.7走超声清洗器5.8 研钵。5.9离心管;聚丙烯，具塞,50 mL6试样制备与保存6.1一般要求在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。6.2试样制备取有代表性样品500g，混匀装入洁净的盛样容器内，密封弃标明标记。6.3试样保存奶粉、红酒、果汁、糕点、蜜饯、甜酸头于α℃～~4℃以卡保存，液态奶、酸奶、奶油、奶酪、冰激凌于-18℃以下冷冻保存。7 测定步骤7.1　提取7.1.1奶粉、液态奶、酸奶、奶油、奶酪、冰激凌称取奶粉1g(精确至0.01 g），液态奶、酸奶、冰激凌各2g（精确到0.01g)试样于 50 mL离心管中，称取2 g(精确至0.01 g)奶油、奶酪于研钵中，加入5g海砂充分进行研磨，使其分散均匀，研磨后的样品置于50mL离心管中，加人15mL提取液（4.12），涡旋混匀3min，超声30 min后，取出加入1mL10%亚铁氰化钾（4.9）和1mL 20%乙酸锌溶液（4.10）以及 5 mL三氯甲烷，涡旋混匀2min，以7500 r/