SNT 1769-2006进出口肉及肉制品中甲氧苄氨嘧啶残留量测定方法 液相色谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1769-2006进出口肉及肉制品中甲氧芙氨嘧残留量测定方法液相色谱法Determination of trimethoprim residues inmeat and meat products for import and export-Liquid chromatographic method2006-04-25 发布2006-11-15实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局足辣路19515查数码防伪 SN/T 1769—2006前言本标准的附录 A为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国黑龙江出人境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：杨长志、康庆贺、马东升、张洪祥、张兰风。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 1769-2006进出口肉及肉制品中甲氧苄氨嘧啶残留量测定方法液相色谱法1范围本标准规定了进出口肉及肉制品中甲氧芊氨嘧啶残留量检验的抽样、制样和高效液相色谱测定方法。本标准适用于进出口鸡肉和猪肉中甲氧氨嘧啶残留量的检验。2抽样和制样2.1检验批以不超过2500件商品为一个检验批。间一检验批的商品应具有相同的特征，如：包装、标记、产地、规格和等级等。2.2抽样数量抽样数量见表1。表 1单位为件批量最低抽样数11~25526~10010 101~250251~500.15 501~1 000171 001~2 500202.3抽样方法按2.2规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。从每件中取一袋作为原始样品，其总量不得少于2kg。放人清洁容器内，加封后，标明标记，及时送实验室。如每件中无小包装，或有小包装但质量超2kg者，则可用灭菌刀在抽出的包件中，每件割取不少于100g。混合后置于清洁容器内，作为混合原始样。混合原始样的重量不少于2kg。加封后，标明标记，及时送交实验室。2.4试样制备从所取原始样品中缩分出1kg，经捣碎机充分捣碎均匀，均分成两份，分别装入洁净容器内作为原始样品。密封并标明标记。在抽样和制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。2.5试样保存将试样于一18℃以下冷冻保存。3测定方法3.1方法提要试样中残留的甲氧氨嘧啶用三氯甲烷和酸性甲醇提取，提取液调至碱性后，用二氯甲烷萃取。1 SN/T 1769—2006萃取液经浓缩，残渣用流动相溶解，经三氯甲烷净化后，用配有紫外检测器的高效液相色谱仪测定，外标法定量。3.2试剂和材料除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为去离子水。3.2. 1)甲醇：色谱纯。3.2.2正已烷：色谱纯。3.2.3二氯甲烷：色谱纯。3.2. 4三氯甲烷:色谱纯。无水硫酸钠：经650℃灼烧4h,置于干燥器内备用。3.2.5高氯酸溶液：0.5%(体积分数)。取5mL优级纯高氯酸溶于1000mL水中。3.2. 6硫酸溶液：0.1moi/L取5.4mL优级纯硫酸溶于1000mL水中。3.2.7氢氧化钾溶液：2mol/L。取112.2g优级纯氢氧化钾溶于1000mL水中。3.2.8甲氧芊氨嘧啶标准品：纯度≥99%。3. 2.9甲氧苄氨嘧啶标准溶液：准确称取适量的甲氧苄氨嘧啶标准品，用甲醇配成浓度为100 μg/mL3.2. 10的标准储备液，根据需要再用流动相稀释成适当浓度的标准工作液。3.3仪器和设备高效液相色谱仪：配有紫外检测器。.2组织捣碎机。3.3.3离心机。3.3.4旋涡混合器。3.3.5旋转蒸发器。3.3.6氮吹仪。3.3.7分液漏斗：250mL。具塞离心管：15mL、50mL。3.3.8无水硫酸钠柱：8.0cmX15 cm(内径)玻璃柱，内装5cm高无水硫酸钠。.10滤膜:0.45 μm。3.4 测定步骤3.4.1提取称取试样约5g（精确到0.1g）于 50mL离心管中，加入15mL)三氯甲烷和20mL甲醇+0.1mol/L硫酸溶液（7,+3），盖塞，于旋涡混合器上快速混合2min，在3000 r/min离心3min。将上清液转移到250mL分液漏斗中：再用20mL甲醇+0.1mol/L硫酸溶液(?+3)重复提取一次。合并提取液于同一250mL分液漏斗中。于分液漏斗中加2mL2moi/L氢氧化钾溶液，用2×80mL二氯甲烷充分振摇萃取2min,静置分层。将二氯甲烷层通过无水硫酸钠柱脱水于250mL浓缩瓶中，在45℃水浴中用旋转蒸发器浓缩至近干,再用氮气流吹干。准确加人2mL流动相()溶解残渣。3.4.2净化将上述溶液转移到15mL离心管中，加人5mL三氯甲烷在旋涡混合器上快速混合2min。于3000 r/min离心2min，将上清液过0.45μm滤膜后供高效液相色谱测定。3.4.3测定3. 4.3. 1液相色谱条件色谱柱:Inertsil ODS-3,