SNT 2538-2010进出口动物源性食品中二甲氧苄氨嘧啶、三甲氧苄氨嘧啶和二甲氧甲基苄氨嘧啶残留量的检测方法 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2538--2010进出口动物源性食品中二甲氧芒氨嘧啶、三甲氧苄氨啶和二甲氧甲基芊氨嘧啶残留量的检测方法液相色谱-质谱/质谱法Determination of sulfonamides potentiator residuesin animal origin foodstuffs for import and export-LC-MS/MS method2010-03-02 发布2010-09-16 实施中华人民共和国发布15惑国家质量监督检验检疫总局，数码防伪 SN/T 2538—2010言前本标准的附录 A、附录 B、附录 C 和附录 D均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国江苏出人境检验检疫局、重庆出人境检验检疫局。本标准主要起草人：李贤良、丁涛、张晓燕、王国民、张雷、章宇、张婧、曹淑瑞。 SN/T 2538-2010进出口动物源性食品中二甲氧芊氨嘧啶、三甲氧苄氨嘧啶和二甲氧甲基苄氨嘧啶残留量的检测方法液相色谱-质谱/质谱法1 范围本标准规定了动物源性食品中二甲氧苄氨嘧啶（简称:DVD)、三甲氧苄氨嘧啶（简称：TMP）、二甲氧甲基苄氨嘧啶(简称：OMP)三种磺胺类增效剂残留量的制样和液相色谱-质谱/质谱检测方法。本标准适用于肌肉(猪肉、鸡肉）、内脏(猪肝、牛肾、鸡肝）、牛脂肪、鸡蛋、鱼肉、牛奶及蜂产品（蜂蜜和王浆)中二甲氧苄氨嘧啶、三甲氧苄氨嘧啶、二甲氧甲基苄氨嘧啶三种磺胺增效剂残留量的测定和确证。2方法提要试样中的磺胺增效剂用三乙胺-乙腈混合提取液或三氯乙酸-乙腈溶液提取，提取液经反相阳离子混合固相萃取柱净化、浓缩和脱脂后，用液相色谱-串联质谱仪测定和确证，外标法峰面积定量。3试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。3.1 三氯乙酸。3.2 浓氨水(28%）。3.3 三乙胺。3.4　乙腈：色谱纯。3. 5甲醇:色谱纯。3.6正已烷：色谱纯。3.7甲酸:色谱纯。3.8甲酸铵：优级纯。3. 9无水硫酸钠：650℃灼烧4h，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。3. 10乙腈饱和的正已烷：正已烷中加人乙腈饱和。0.2%甲酸溶液:取2mL甲酸,用水稀释至1000mL。3.113.125%氨水-甲醇溶液：取 50 mL浓氨水,用甲醇稀释至1000mL。3.13乙腈-水溶液：取80mL水，用乙腈稀释至100mL。3.1410%三氯乙酸溶液:称取100g三氯乙酸,用水稀释至1000 mL。三乙胺-乙腈混合提取液：取适量三乙胺和乙腈,按1十99(体积比)混合备用。3. 153.1610%三氯乙酸-乙腈混合提取液：移取适量10%三氯乙酸溶液（3.14)和乙按7+3(体积比）混合备用。3.17二甲氧苄氨嘧啶（Diaveridine,CAS号：5355-16-8，分子式：C13H16N4O2）标准品：纯度大于或等于 99. 0%。3.18三甲氧氮嘧啶（trimethoprim,CAS号：738-70-5,分子式：C14 H18N4O3）标准品：纯度大于或等于 99.5%。1 SN/T 2538-—20103.19二甲氧甲基苄氨嘧啶（ormetoprim,CAS号：6981-18-6,分子式：C14H18N4O2）标准品：纯度大于或等于99.0%。3.20空白样品提取液：用不含三甲氧苄氨嘧啶、二甲氧芒氨嘧啶、二甲氧甲基苄氨嘧啶残留的样品，按照6.1、6.2制备空白样品提取液。3.21标准储备液：准确称取适量三甲氧苄氨嘧啶、二甲氧苄氨嘧啶、二甲氧甲基苄氨嘧啶标准品，分别用乙腈配制成浓度为100 μg/mL的标准储备液。此溶液在0℃～4℃避光保存。3.22标准工作溶液：除蜂王浆、蜂蜜和牛奶样品标准溶液用流动相起始比例溶液配制以外，其余样品根据需要用空白样品提取液将标准储备液稀释成适当浓度的标准工作溶液。置于0℃～4℃避光保存。3.23阳离子固相萃取柱:PCX,60gmg+3ml或相当者-;使用前用_3mmL水和 3 mL 甲醇活化。3.240.22μm微孔滤膜，有机系。4仪器和设备高效液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源(ESI)4.14.2组织捣碎机。4.3天平：感量为0.1 mg和0.01g。4.4均质器：10000 r/min。4.5 离心机:10 000 r/min。4.6氮吹仪。4.7具塞塑料离心管：50 mL。5试样制备与保存5.1试样制备5.1.1　牛奶取代表性样品500g，混匀，均分成两份作为试样，分装人洁净的容器内，密闭并标明标记。5.1.2·肌肉、内脏和鱼等试样取代表性样品500g,将其切碎后，依次用捣碎机将样品加工成浆状，混匀，分装人洁净的盛样袋内，密封并标明标记。5.1.3蛋取有代表性样品约500g，搅