SN_T 3418-2012杏小卷蛾检疫鉴定方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3418-2012杏小卷蛾检疫鉴定方法Detection and Identification of Cydia prunivora (Walsh)2013-07-01实施2012-12-12发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局- SN/T3418—2012前言本标准按照GB/T1.1--2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院。本标准主要起草人：娄定风、焦懿、马菲、余道坚、于艳雪、李秋枫、段胜男、刘新娇、曹逸霞、徐浪、周贤。 SN/小卷蛾检疫鉴定方法1范围本标准规定了杏小卷蛾Cydiaprunivora（Walsh)的检测、饲养、标本制作和室内鉴定等方法。本标准适用于进出境植物检疫工作中杏小卷蛾的检测、饲养和鉴定。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1翅脉vein支持翅膜的似杆或似脉的构造。有Sc脉、R1-x脉、M1-x脉、Cu1-x脉、A1-x脉。2.2翅斑speckle由鳞片排列成的斑纹。在翅基部的为基斑，翅中部的为中带，翅靠外缘前端的为端纹。翅前缘弯曲的为钩状纹。2.3产卵瓣valvulae为雌性外生殖器最末端的一对带有许多毛的肛乳突。2.4臀栉anal comb为鳞翅目幼虫肛上板的腹面一骨化的栉形构造。2.5趾钩crochet着生在幼虫的腹足与臀足的趾节的腹面上钩状结构。2.6臀棘cremaster蛹的未腹节的顶端和腹部末端的刺。3杏小卷蛾基本信息（参见附录A)学名：Cydiaprunivora(Walsh)。异名:Grapholita prunivora(Walsh); Enarmonia prunivora Walsh; Semasia prunivoraWalsh;Laspeyresia prunivoraWalsh。英文名：lesserappleworm，plummoth。属鳞翅目Lepidoptera，卷蛾科Tortricidae。杏小卷蛾主要以幼虫随果实或以蛹随附着在寄主植物上的土壤远距离传播扩散。小卷蛾属Cydia世界已知200余种。属内形态上与梨小卷蛾近似的重要经济种类有梨小卷蛾Cydiapyrivora、苹果蛾Cydiapomonella、山楂小卷蛾C.janthinana、豆荚小卷蛾C.nigricana等1 SN/T3418—2012该虫的地理分布和生物学特性等基本信息参见附录A。4方法原理根据杏小卷蛾的危害状，用肉眼或放大镜观察寄主果实，解剖可能带虫果实，取得幼虫和蛹的虫样、饲养获得成虫，解剖制作雄外生殖器标本，用显微镜观察，根据形态特征对种类进行判定。5器材及试剂5.1仪器和用具生物显微镜、体视显微镜、测微尺、放大镜、昆虫解剖针、解剖刀、镊子、指形管、三级台、标本盒、樟脑精、干燥剂、试管、载玻片、培养皿帕瓷盘酒精灯标签、记录纸、养虫笼、人工气候箱等。5.2试剂无水乙醇，80%乙醇，70%乙醇，T苯，乙酸乙酯，封口蜡：幼虫或蛹保存液：75%乙醇e0ml，内三醇0.5.mL~1mli组织消化液：10%NaOH(KQH)溶液。6检测与饲养6.1检测目检寄主果实表面、萼凹部否有危害状如蛀孔、虫粪及腐燃用刀将可疑的果实剖开，仔细检查是否有幼虫。如发现可疑虫体，以指形管盛装.加标签或编号，记录时间、地点、寄主、采集人等，带回实验室。6.2饲养对幼虫、蛹的鉴定仍然不能确定为查小卷蛾，将其饲养为成虫薄进行鉴定。将带虫果实放人养虫笼中的培养皿里，养虫笼里放一些皱褶纸板供幼虫化蛹用。同时建立饲养记录卡，记录幼虫编号、采集地点、时间、输出国家或地区、寄主、采集饲养人。饲养条件为：温度25℃±1℃，相对湿度50%～60%，每旧光照14h。条件不满足的可在人工气候箱中按前述条件设置并饲养。7标本的制作准备7.1成虫标本7.1.1展翅标本成虫采用插针展翅法制成标本，放入标本盒内长期保存，盒内放入樟脑精、干燥剂，以防虫蛀、发霉，并放入注：明学名、采集地、采集时间和采集者等信息的标签。7.1.2浸泡标本如果以后用来进行分子生物学试验，可把标本放人无水乙醇浸泡，并冷冻保存。2 SN/T3418—20127.2玻片标本7.2.1翅脉玻片标本取完整成虫的前、后翅，用二甲苯或乙酸乙酯除去翅上鳞片置于载玻片。7.2.2成虫外生殖器玻片标本剪开雄性成虫腹部，将其置于试管中，放人10mL10%NaOH(KOH)溶液，将试管倾斜地在酒精灯上煮沸，直到腹部透明。将试管里的内含物倒在白瓷盘里，用一根昆虫解针钩住抱器瓣，用另一根昆虫针拉出生殖器，放水里清洗，以80%酒精保存，置于载玻片上，雌成虫生殖器制片比照上述方法、8鉴定特征8.1卷蛾科鉴定特征（参见附