SN_T 4604-2016进出口中药材中真菌毒素的测定.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4604--2016进出口中药材中真菌毒素的测定Determination of mycotoxins in Chinese herbal medicine for import and export2016-08-23 发布2017~03-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局DX金屋香真行 SN/T 4604—2016前言本标准按照GB/T1.1一2009 给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国重庆出人境检验检疫局、中华人民共和国上海出入境检验检疫局。本标准主要起草人：聂福平、唐柏彬、杨俊、存显、王国民、李贤良、王昱、吴蕊、田郡、孔德英、杨惠琴。I SN/T 4604--2016进出口中药材中真菌毒素的测定1范围本标准规定了进出口中药材中黄曲霉素 B、B²、G1、G2、M1、M²，赭曲霉素 A,伏马菌素 Bi、B2，T-2毒素,HT-2毒素，,二羟基苯甲酸内脂类真菌毒素的液相色谱-质谱/质谱检测方法。本标准适用于进出口当归、桔梗、五味子、枸杞、大青叶、金银花、地龙中黄曲霉素 B1、B2、G1、G2、M、M²，赭曲霉素 A，伏马菌素 B、B2，T-2 毒素,HT-2 毒素，二羟基苯甲酸内脂类真菌毒素的液相色谱-质谱/质谱测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要样品经PBS溶液和甲醇提取，提取液经稀释、过滤后，用免疫亲和柱净化，洗脱液氮吹干定容后，用液相色谱-质谱/质谱测定，外标法定量。4试剂材料除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的-级水。4.1甲醇:色谱纯。4.2乙腈：色谱纯。4.3甲酸：色谱纯。4.4乙酸铵：色谱纯。4.5十二水磷酸氢二钠。4.6氯化钾。4.7磷酸二氢钾。4.8氯化钠。4.9浓盐酸。4.10吐温。4.11氢氧化钠。4.120.1 mol/L盐酸溶液:量取9 mL浓盐酸（4.9）,用水稀释至 1000 mL。4.131mol/L氢氧化钠溶液：称取40.0g固体氢氧化钠（4.11），用水溶解并稀释至1000mI。4.14pH7.4PBS溶液：称取2.92g十二水磷酸氢二钠（4.5）、0.20g氯化钾（4.6）、0.20g磷酸二氢钾(4.7)和8.00gNaCl(4.8)用900mL水溶解，用0.1mol/L盐酸溶液（4.12)或1mol/L氢氧化钠溶液(4.13)调节pH值到7.4，用水稀释至1000mL。1 SN/T 4604—20164.150.1%吐温PBS溶液：称取0.5g吐温，用pH7.4PBS溶液（4.14)溶解并稀释至500mL。4.162mmol/L乙酸铵溶液（含0.1%甲酸）：准确称取0.154g乙酸铵（4.4），用水溶解并转移至1000ml容量瓶中,加人1mL甲酸（4.3），用水定容至刻度。4.17甲醇-2 mmol/L乙酸铵溶液（含0.1%甲酸）（40：60,体积比）：量取40mL甲醇和60mL2mmol/L乙酸铵溶液（含0.1%甲酸）（4.16），混匀。4.18黄曲霉素 Bi、B2、G1、G2、M1、M²，赭曲霉素 A,伏马菌素 B1、B2,T-2 毒素,HT-2 毒素，二羟基苯甲酸内脂类标准品：标准物质纯度为≥98%，标准品信息见附录A表A.1。4.19标准储备液：分别准确称取适量标准物质，用乙腈配制成浓度为100mg/mL的标准储备溶液。4℃下避光保存。4.20混合标准工作溶液：分别准确移取一定体积的每种标准储备液，混合后50℃氮吹至干后用甲醇-2mmol/L乙酸铵溶液（含0.1%甲酸）（40：60，体积比）（4.17)重新溶解制成适当浓度的混合标准工作液，4℃下避光保存。4.21免疫亲和柱：Myco6in1TMLC/MS/MS亲和柱，或相当者。4.22滤膜:0.22 μm,有机系。5仪器和设备5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。5.2分析天平：感量分别为0.1mg和0.01g。5.3高速均质器。5.4离心机：转速不低于4000r/min。5.5恒温氮吹装置。5.6涡旋混合器。5.7玻璃微纤维滤纸。5.8 粉碎机。6试样制备与保存从所取样品中取出具有代表性样品适量，磨碎混匀后，装入洁净的塑料袋中，密封，并标明标记。7 分析步骤7.1提取称取5g试样（精确到0.01g)置于 50 mL具塞塑料离心管中，加人1g氯化钠，再加入PBS溶液（4.14)25mL，均质提取2min，5000r/min离心10min，将全部上清液用玻璃纤维滤纸过滤后