SN_T 3767.16-2014出口食品中转基因成分环介导等温扩增（LAMP）检测方法 第16部分：大豆A5547-127品系.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3767.16—2014出口食品中转基因成分环介导等温扩增（LAMP)检测方法第16部分：大豆A5547-127品系Loop-mediated isothermal amplification detection method for geneticallymodified components in food for export-Part 16 :Soybean A5547-1272014-08-01实施2014-01-13发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 3767.16--2014前言SN/T3767《出口食品中转基因成分环介导等温扩增(LAMP)检测方法》共分为30部分：第1部分：通用要求和定义；第2部分：筛选方法；第3部分：玉米Bt-11品系；第4部分：玉米Bt176品系；第5部分：玉米GA21品系；第6部分：玉米MIR162品系；第7部分：玉米MIR604品系；第8部分：玉米MON810品系；第9部分：玉米MON863品系；第10部分：玉米MON88017品系；第11部分：玉米MON89034品系；第12部分：玉米T-25品系；第13部分：玉米3272品系；第14部分：玉米59122品系；第15部分：大豆A2704-12品系；第16部分：大豆A5547-127品系；第17部分：大豆DP356043品系；第18部分：大豆GTS40-3-2品系；第19部分：大豆MON89788品系；第20部分：水稻Bt-63品系；第21部分：水稻KF6品系；第22部分：水稻KF8品系；第23部分：水稻KMD品系;第24部分：水稻LLRICE62品系；第25部分：水稻M12品系；第26部分：水稻T1C-19品系；第27部分：水稻T2A-1品系；第28部分：小麦B73-6-1品系；第29部分：甜菜H7-1品系；第30部分：油菜RT-73品系。本部分为SN/T3767的第16部分。本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国汕头出人境检验检疫局、中华人民共和国广东出人境检验检疫1 SN/T 3767.16—2014局、中华人民共和国山东出人境检验检疫局、中华人民共和国珠海出人境检验检疫局、中华人民共和国北京出人境检验检疫局、中华人民共和国上海出人境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局、仲恺农业工程学院、广州迪澳生物科技有限公司。本部分主要起草人：蔡颖、刘津、周广彪、刘静宇、谢力、高宏伟、冯家望、曾静、李晓虹、陈颖、曹际娟、李志勇、高苏娟、石磊、高东微、张隽、陈源树、李婷、关丽军。Ⅱ SN/T 3767.16—2014出口食品中转基因成分环介导等温扩增（LAMP)检测方法第 16部分：大豆A5547-127品系1 范围SN/T3767的本部分规定了食品中转基因大豆A5547-127品系特异性的环介导等温扩增(LAMP)初筛检测方法。本部分适用于大豆及其加工产品中转基因大豆A5547-127品系特异性成分的定性检测。本方法的定性检测低限为0.5%（质量分数。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682　分析实验室用水规格和试验方法。GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求GB/T 19495.3 车转基因产品检测核酸提敢纯化方法GB/T 19495.7 车转基因产品检测抽样和制样方法SN/T3767.2--2014出口食品中转基因成分环介导等温扩增（LAMP)检测方法第2部分：筛选方法转基因植物及其产品成分检测耐除草剂大豆A5547-127及其衍生品种定性PCR方法（农业部1485号公告-8-2010)3防污染措施环介导等温扩增检测过程的防污染措施应符GB/T 19495.2的规定，4抽样与制样按照GB/T19495.7的规定执行。5 #核酸提取纯化按照GB/T19495.3的规定执行。6LAMP检测方法6.1原理6.1.1般原理根据转基因大豆 A5547-127品系外源基因和大豆边界序列设计特异性内引物和外引物各一对，,特1 SN/T 3767:16—2014异性目标序列和引物碱基序列参见附录 A,引物特异性识别目标序列上的六个独立区域,利用Bst 酶启动循环链置换反应，在大豆A5547-127品系特异目标序列启动互补链合成，在同-一链上互补序列周而复始形成有很多环的花椰菜结构的茎-环DNA混合物；从 dNTP析出的焦磷酸根离子