LY_T 2780-2016松疱锈病菌检疫技术规程.pdf

B 16ICS 65.020LY中华人民共和国林业行业标准LY/T 2780—2016松疱锈病菌检疫技术规程Technical rule for quarantine of Cronartium ribicolaJ. C. Fischer and Rabenhorst2016-12-21发布2017-03-01实施国家林业局发布 LY/T言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由全国植物检疫标准化技术委员会林业分技术委员会(SAC/TC271/SC2)提出并归口。本标准起草单位：四川省森林病虫防治检疫总站、四川农业大学林学院。本标准主要起草人杨佐忠、崔晓充、刘应高、宋天辉、韩珊、李妹江，I LY/T 2780—2016C.3显微化学检验C.3.1检测对象3年生以下实生苗或非发病季节的可疑罹病松针、枝干部皮层。C.3.2受检样品选取1年～3年生幼苗上带有黄色或红褐色班点的松针1cm段或罹病松针之小（侧)枝5cmX5cm大小皮层作样品；对成龄植株枝干上有黑色粗皮者，于病健组织交界处切取2cmX4cm大小的树皮2块~3块作为受检样品。C.3.3切片将采集的可疑性针叶组织样品和枝干皮层组织样品，用FAA固定液脱脂处理2h～24h后切成透明薄片。C,3.4染色检验方法及结果根据试验条件，可选择下列任一种染色方法，试剂配制按照GB/T29587-—2013执行。C.3.4.1苯胺蓝一番红染色法待检组织切片置于载玻片上十0.25%苯胺蓝液（煤染剂）染色5min-+蒸偏水冲洗-+0.05%番红乙醇液浸染1min~3min→+蒸馅水漂洗干净+镜检。寄主组织呈黄色至棕黄色，如被侵菜，则菌丝呈蓝色至蓝绿色，C.3.4.2乳酚蓝染色法待检组织切片置于载玻片上十乳酚蓝液浸染5min～10min-+蒸馏水漂洗干净十5%硫酸（作浮载剂-→+镜检。寄主组织呈木黄色或本色，如被侵染，则菌丝呈蓝色。C.3.4.3亮绿一番红染色法待检组织切片置于载玻片上十0.1%亮绿液浸染3min~5min-+蒸馏水清洗→0.3%香红福尔马林液案1min5min-→+蒸馈水漂洗干净+镜检。寄主组织呈棕红（黄）色，如被侵染，则菌丝呈绿色C.3.4.4孔雀石绿一番红染色法待检组织切片置于载玻片上十5%孔蛋绿减浸荣2min+蒸增水清洗-→0.5%番红液染3min~5min+燕馏水漂洗-+5%硫酸（作浮载剂)-+镜检。寄主组织呈棕红（黄）色，如被侵染，则菌丝呈绿色。C.3.4.5品红染色法C.4结果判定如果样品具有形态鉴定描述的形态特征，且符合柱锈属Cronartism分种检索表(参见附录D)对茶 LY/T 2780—2016蔗生柱锈菌的描述，则可判定待检样品携带有Cronartismribicola；根据染色检验结果，在待检皮层细胞内发现菌丝时，可确认样品被松疱锈病菌侵染。如仅在松针细胞内发现菌丝，则不能区分样品是被松针锈病菌Coleosporiumsp.还是松施锈病菌侵染，需进一步通过试种观察确定，如针叶组织中的菌丝不向枝干皮层蔓延，则非松疱锈病菌；反之，如菌丝扩展至枝干皮层组织，即为松疱锈病菌。10 LY/T 2780—2016附录D（资料性附录）柱锈属Cronartium分种检家表1.单维松寄生双维松寄生2.五针松寄生；锈孢子器基部（皮层下)宽8mm以下单叶松和食用松客生锈孢子器基部宽10mm以上西方柱锈菌C.occidentale茶薰生柱锈荫茶薰子专化型C.ribicolaf.sp.ribicola转主寄主以马先赏为主茶薰生柱锈菌马先燕专化型C.ribicolef.sp.edicularis4.生枝干上生球果上5.病部皮层坏死形成溃疡病部皮层不坏死，木质部增生形成木质瘦瘤6.锈孢子表面无光滑区锈孢子表面有光滑区7.锈孢子裂形至棒形云兰柱锈菌C.comandrae锈孢子长椭围形阿巴拉契亚柱锈菌C.appalachianum8.病部木质部增生形成纵向隆起带香蕨柱锈菌C.comptoniae病部皮层增生略肥大呈长极形9.锈孢子表面有明显的光滑区；分布北美洲..类鞘孢柱锈菌C.coleosporioides锈孢子表面有近似的光滑区；分布欧洲和亚洲柔软柱锈菌C.flaccidum10.奥瘤球形，半球形栎柱锈菌C.quercuum.栎柱锈菌梭型专化型C.quercuumf.sp.fusiforme11.锈孢子器半埋于寄主组织中；分布美国东南部.球果柱锈菌C.trobilia.u.锈孢子器完全突出寄主表面也可危害小枝形成髓质瘤；分布美国南部至中美洲椎型柱锈菌C.conigenum LY/T 2780—2016松疱锈病菌检疫技术规程1范围本标准规定了松疮锈病的检疫范围、产地检疫、调运检疫、检验鉴定、除害处理及检疫监管的程序和方法。本标准适用于对松