GA_T 1962-2021CN法庭科学 大麻性别基因特异片段检测 毛细管电泳荧光检测法.pdf

ICS 13.310GA中华人民共和国公共安全行业标准GA/T 1962—2021法庭科学大麻性别基因特异片段检测毛细管电泳荧光检测法Forensic scienceDetection of Cannabis sativa L. sex-determining genefragmentCapillary electrophoresis and fluorescence method2021-10-14发布2022-05-01实施中华人民共和国公安部发布 中华人民共和国公共安全行业标准法庭科学大麻性别基固特异片段检测毛细管电泳荧光检测法GA/T 1962—2021.中国标准出版社出版发行北京市朝阳区和平里西街甲2号(100029)北京市西城区三里河北街16号(100045)网址 ,cn总编室;(010行中心：(010者服务部：(010国标准出版社秦皇岛印剧厂印别各地新华书店经销开本880X1230 1/16印张0.5字数14千字2022年5月第一版2022年5月第一次印期书号：155066·2-36575定价17.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话：(010 GA/T 1962—2021前言本文件按照GB/T1.1一2020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由全国刑事技术标准化技术委员会(SAC/TC179)提出并归口，本文件起草单位：公安部物证鉴定中心、最高人民检察院检察技术信息研究中心、毕节市公安局。本文件主要起草人：裴黎、徐小玉、涂政、彭建雄、张颗、牛慧媛、马原、张贵芹、冯涛、郭佳、董林芳、孔铭华、李元元、祝世敬。I GA/T 1962—2021法庭科学大麻性别基因特异片段检测毛细管电泳荧光检测法1范围本文件规定了法庭科学脱氧核糖核酸(DNA)实验室通过聚合酶链式反应(PCR)复合扩增、毛细管电泳荧光检测鉴别大麻性别的材料准备、操作方法和结果判定。本文件适用于除大麻种籽外大麻植物及其相关制品的性染色体类型的检验，2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款，其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GA/T 3822014法庭科学DNA实验室建设规范GA/T见毒品原植物的DNA提取二氧化硅法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1性染色体sex chromosome与决定性别相关的染色体，包括X染色体和Y染色体。3.2阳性对照positive control在PCR系统中加人已知分型的模板DNA进行的对照反应，本文件中指加人已知雌性、雄性大麻样本DNA模板的扩增反应。3.3阴性对照negative control不含模板DNA但含有PCR系统中所有其他成分的对照反应。器材器材包括：a)移液器；b)台式离心机；c)扩增仪；全自动荧光分析仪。 GA/T 1962—20215试剂试剂包括：a)纯水；b)PCR扩增引物：引物对1(X染色体)；(F)5’FAM-AGCCTGTCTAAGAGTGGG3(R)5ACGTTGTTGCTCGTAAAT3引物对2(Y染色体)；(F)5FAM-GCCCAAGTTGCTGCTGAG3′(R)5CCCACCGTTTAGGGAGCA3°c)PCR暖冲液；d)热启动TaqDNA聚合酵；e)氯化镁(MgCl)溶液;f)脱氧核糖核苷三磷酸(dNTPs)；g)分子量内标；h)去离子甲酰胺；i)已知雌、雄性大麻DNA(阳性对照)，实险室环境要求符合GA/T382—2014中第5章的要求。7操作步票7.1扩增反应7.1.1准备待扩增样品并编号，检材DNA提取方法见GA/T1160—2014。7.1.2取出冷激的扩增试剂使其温度达到室温，轻弹混匀、离心。7,1.3选择适当的扩增反应体系进行扩增，可参照表1计算反应用量，配置扩增反应体系，表 1大麻性别基因特异片段PCR反应体系试刻用量pL终妆度10X PCR Buffer2.5 -dNTPs(2.5 mmol/L)2.00.2 mmol/LMgCl, (25 mmol/L)2.02 mmol/L引物对 1 (5 μmol/L)上、下差各 0.850.17 μmol/L引物对 2 (5 μmol/L)上、下警各1.00.2 μmol/ L热启动 TaqDNA象合酶(5 U/μL)0,20.04 U/μL纯水13.6一04 GA/T 1962—2021表1大性别基因特异片段PCR反应体系（续）试剂用量μL终浓度模板