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实验二免疫球蛋白的粗提;实验一、免疫球蛋白的粗提;实验目的： ;多克隆抗体血清含有多种蛋白质组分，不适用于实验室分析、检测应用。
根据实验目的不同，可按照不同的方法对有效的抗体成分进行分离、纯化。
;盐析法原理; 盐析法沉淀抗原的机理;第7页/共15页;材料与试剂配制
1．动物血清
2．硫酸铵饱和溶液
硫酸铵 800g~850g
H2O 1 000ml
加热至绝大部分溶质溶解为止，趁热过滤，置室温过夜，然后以28％NH4OH调pH至7.0（不调pH值也可以）。
注：硫酸铵以质量优者为佳，因次品中含有少量重金属对蛋白质巯基有影响。如次品必须除去重金属，可在溶液中通入H2S，静置过夜后滤过，
加热蒸发H2S即可。;3．0.01Mol/L pH7.4 PBS液
A液：0.10Mol/L NaH2PO4液
NaH2PO4·2H2O 15.60g
加H2O至 1 000.ml
B液：0.10Mol/L Na2HPO4液
Na2HPO4·12H2O 35.80g
加H2O至 1 000ml
取A液19ml，B液81ml加水至1 000ml即可。
4．0.50 Mol/L的HCl液和0.50 Mol/L的NaOH液。
5．透析袋（或玻璃纸）。
;实验步骤;重复步骤3～5，2次
7. 取沉淀溶于0.5 mL 生理盐水中
↓
装入透析袋
透析除盐，在常水中透析过夜，
再在生理盐水/PBS中于4℃透析24h，中间换液数次。
取出放于聚乙二醇浓缩10min，取出打开将提取物放于EP管中，-20摄氏度保纯备用。
;;注意事项;作业与思考题：;感谢您的欣赏
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