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病毒学总论解读第1页/共113页第2页/共113页病毒学总论第3页/共113页 病毒(virus)的发现1892年发现第一个病毒即烟草花叶病毒1898年发现动物口蹄疫病毒首先被证实对人类有致病性的是黄热病毒(1901年发现)第4页/共113页病毒的特点:1、体积微小,必须用电子显微镜观察;2、只有一种遗传物质;3、必须在活细胞内显示生命活性;4、无完整的细胞结构。第5页/共113页病毒学: 即研究病毒的本质、病毒与宿主相互作用和规律的生物学科。医学病毒学: 即研究人类病毒的本质及其与人类疾病关系的一门学科。第6页/共113页1、临床约70-80%传染病是由病毒引起的;2、病毒性疾病对人类健康危害极大;3、近20年来,新病毒不断被发现,由此引发的病毒性疾病正越来越多的被人们所关注.第7页/共113页第一节 病毒的形态结构与分类病毒体(virion)——完整的具有传染性的病毒颗粒,有典型的形态和传染性。第8页/共113页一 病毒的大小与形态烟草花叶病病毒噬菌体葡萄球菌1000nm65×95nm腺病毒痘苗病毒流感病毒70nm100nm300×250nm30nm脊髓灰质炎病毒乙脑病毒40nm 立克次体450nm衣原体390nm1、测量单位——纳米(nm)3、观察工具——电子显微镜2、大多数病毒的直径小于150 nm第9页/共113页病毒的形态: 多为球型,还有杆状、子弹状、砖块状及蝌蚪状等。第10页/共113页1、病毒核酸 (1)化学成分为DNA或RNA,据此将病毒分DNA病毒和RNA病毒。 (2)核酸可线型或环型、分单股或双股,一般DNA病毒为双股,RNA病毒为单股;大小相差悬殊。 (3)携带病毒的全部遗传信息,是病毒的基因组,控制病毒的生殖、遗传和变异。第11页/共113页2、病毒衣壳:由多肽构成的壳微粒组成,有三种排列方式:螺旋对称立体对称复合对称第12页/共113页包膜子粒、 刺突3、病毒包膜包膜包膜(envelope):包绕在核衣壳外,上常有刺突(spike),是病毒的表面抗原。第13页/共113页4、病毒的蛋白质结构蛋白:是组成病毒体的蛋白成分,可离心沉淀后分离纯化。 (1)衣壳蛋白: (2)基质蛋白: (3)包膜蛋白:第14页/共113页非结构蛋白:可存在于病毒体内也可仅存在于宿主细胞内。 (1)病毒内所有的重要的酶类; (2)抑制宿主细胞生物合成或抑制病毒抗原经MHC递呈的蛋白; (3)转化宿主细胞的作用; (4)抗细胞因子或抗细胞凋亡作用。第15页/共113页三、病毒的分类分类原则:1、核酸类型和结构; 2、病毒体的形状和大小; 3、病毒体的形态结构; 4、对脂溶剂的敏感性。第16页/共113页1、DNA病毒类;2、RNA病毒类; 3、DNA和RNA逆转录病毒类。第17页/共113页1、卫星病毒(satellites):基因组缺陷的病毒,一类为可编码自已衣壳蛋白;另一为RNA分子,需要辅助病毒的衣壳蛋白。500-2000核苷酸,引起植物病变2、类病毒(viroids):植物病毒,单链杆状RNA有二级结构,200-400核苷酸,无包膜,不含蛋白质3、朊粒(prion):3.0×104的蛋白质,引起疯牛病…… 三、其他:第18页/共113页第二节 病毒的增殖 遗传与变异第19页/共113页一、病毒的培养:(一)动物接种 1、不同的病毒,易感动物不同,常用动物有:小鼠、大鼠、豚鼠、兔、猴等; 2、接种的途径也有多种,可:皮下、皮内、脑内、腹腔、静脉等接种; 3、病毒→动物→动物出现感染症状,据症状鉴定病毒或取病变组织进一步检查。 第20页/共113页(二)鸡胚培养1、接种途径有:尿囊腔、羊膜腔、卵黄囊、绒毛尿囊膜2、培养数天后,观察鸡胚情况或取培养物进一步鉴定尿囊腔羊膜腔尿囊腔接种羊膜腔接种第21页/共113页(三)组织培养(最常用细胞培养) 1、优点: (1)便于纯化病毒; (2)可直接观察细胞变化(包括细胞出现病变或转化); (3)可对病毒的复制进行基础性研究; (4)可进行空斑纯化病毒克隆; (5)可滴定病毒含量。第22页/共113页 2、细胞种类: (1)原代细胞: 以无菌手续采动物等的组织切碎洗净后用胰蛋白酶消化得分散的单个细胞,加培养液在细胞瓶内培养所获得的单层贴壁细胞为原代细胞; 原代细胞消化、重新分装并培养所得细胞为次代细胞。 特点:对病毒易感性高,主要作为自标本中分离的工具。第23页/共113页 (2)传代细胞系: 能在体外持续增殖传代的细胞系,多由癌细胞或二倍体细胞突变而成。 (3)二倍体细胞: 在体外分裂50-100代后仍保持其二倍染色体数目的单型细胞,常用人胚肺二倍体成纤维细胞。第24页/共113页 3、病毒在细胞内增殖的检查与鉴定(1)观察细胞变化(cytopathic effect,C
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