NY_T 4031-2021CN 动物源性食品中住肉孢子虫检测方法.docx

ICS 11.220 CCS B 41 NY 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 NY/T 4031—2021 动物源性食品中住肉孢子虫检测方法 Detection methods of Sarcocystis spp. in animal-derived foods 2021-12-15发布 2022-06-01 实施 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T 4031—2021 前 言 本文件按照GB/T1.1—2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由农业农村部畜牧兽医局提出。 本文件由全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC 181)归口。 本文件起草单位：中国农业科学院上海兽医研究所、云南大学生命科学学院。 本文件主要起草人：陈兆国、米荣升、黄燕、龚海燕、张烨华、胡俊杰。 工 1 NY/T 4031—2021 动物源性食品中住肉孢子虫检测方法 1 范围 本文件规定了动物肌肉中住肉孢子虫包囊检查和 PCR 检测方法的技术要求。 本文件压片镜检法适用于牛、羊、猪、马等动物肌肉中住肉孢子虫的检测；PCR 法适用于黄牛中寄生 的隆美尔住肉孢子虫(S. rommeli),水牛中寄生的德宏住肉孢子虫(S.dehongenhsis), 牦牛中寄生的枯 氏住肉孢子虫(S. cruzi)、莱氏住肉孢子虫(S. levinei)、S. hirsuta、S. fusiformis、人住肉孢子虫(S. hominis)、S.buffalonis、中华住肉孢子虫(S.sinensis)、 牛住肉孢子虫(S. bovini),山羊中寄生的山羊 犬住肉孢子虫(S.capracanis)、 家山羊犬住肉孢子虫(S.hircicanis),绵羊中寄生的柔嫩住肉孢子虫(S. tenella)、白羊犬住肉孢子虫(S.arieticanis),马中寄生的柏氏住肉孢子虫(S.bertrami), 猪中寄生的米 氏住肉孢子虫(S. miescheriana)、猪人住肉孢子虫(S.suihominis) 的检测。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 WS/T 230—2002 临床诊断中聚合酶链反应(PCR) 技术的应用 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 cox1:线粒体细胞色素c 氧化酶亚基1(Mitochondrial cytochrome c oxidase subunit 1)基因 DNA: 脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic Acid) EB:溴化乙锭(Ethidium Bromide) PCR: 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction) PBS: 磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffered Saline) TAE:Tris- 乙酸电泳缓冲液(Tris Acetate-EDTA Buffer) 5 样品的采集、保存和运输 5.1 样品的采集 根据不同动物肌肉的具体情况，每头动物采集胴体一个部位或多个部位肌肉，尤其注意采集这些肌肉 中有米粒状包囊的肌肉样品，记为一份肉样，其质量不少于50 g。 5.2 样品的保存和运输 5.2.1 采集的样品，不超过24h 检测的，在2℃~8℃条件下保存即可；1月以内检测的，存放温度不高 于一20℃;超过1个月检测的，存放于一80℃以下冰柜，或浸泡在福尔马林溶液中。所有阳性样品，发出 检测报告30 d 后方可无害化处理。 5.2.2 样品应放在不透水、防泄漏的密封袋中，置于保温盒中，并加冰袋或冰块保持低温，尽快送到实验 室。所有样品应附有一份说明，内容包括样品提交人、样品采集地点(最好标明经度和纬度)、采样日期、联 系方式、动物种类、动物年龄(日龄)、动物部位、动物病史等。 2 NY/T 4031—2021 6 检测方法 6.1 压片镜检法 6.1.1 主要仪器设备 外科手术剪。 不锈钢镊子。 不锈钢、铝合金或塑料肉样盘，内有格子并编号。 载玻片。 普通生物显微镜或倒置显微镜。 6.1.2 试剂 甘油(生化级):市售产品。 甘油透明液(见附录 A 中 的A.1)。 6