NY_T 3533-2020CN 小麦孢囊线虫鉴定和监测技术规程.docx

ICS 65.020.20 B 16 NY 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 NY/T 3533—2020 小麦孢囊线虫鉴定和 监测技术规程 Technical code of practice for identification and monitor of wheat cyst nematode 2020-03-20 发布 2020-07-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 I NY/T 3533—2020 前 言 木标准按照 GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由农业农村部种植业管理司提出并归口。 本标准起草单位：中国农业科学院植物保护研究所。 本标准起草人：彭德良、彭焕、黄文坤、孔令安。 1 NY/T 3533—2020 小麦孢囊线虫鉴定和监测技术规程 1 范围 本标准规定了小麦孢囊线虫鉴定和监测的术语和定义、试剂和设备、鉴定方法、监测方法、调查记录。 本标准适用于小麦禾谷孢囊线虫(Heterodera avenae)和菲利普孢囊线虫(H.filipjevi)的鉴定及监测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 SN/T 1848 植物有害生物鉴定规范 SN/T 2757 植物线虫检测规范 3 术语和定义 SN/T 1848、SN/T 2757界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 小麦孢囊线虫 wheat cyst nematode 可危害小麦、大麦、黑麦、燕麦及多种禾本科牧草的一类孢装线虫，我国有禾谷孢囊线虫和菲利普孢囊 线虫两种，参见附录 A。 3.2 孢囊 cyst 孢囊类线虫发育过程中的特殊阶段，为雌虫死亡后形成的褐色虫体。 4 试剂和设备 4.1 主要试剂 蔗糖、高岭土、甘油、盐酸、甲醛、酸性品红等。 4.2 主要设备 4.2.1 标准网筛：孔径0.9 mm 、0.2 mm 和0.0308 mm。 4.2.2 生物显微镜：40倍～1000倍。 4.2.3 体视显微镜：10倍～120倍。 5 鉴定方法 5.1 样品采集 小麦等植株出现黄化、矮化，根系侧根丛生等症状，抽穗期根部出现白色雌虫，采集根系和根围土壤样 品进行室内鉴定。危害症状参见附录 A。 5.2 形态学鉴定 5.2.1 二龄幼虫和孢囊分离 分离样品中的二龄幼虫和孢囊。分离方法参见附录 B。 5.2.2 标本制作 按 SN/T 1848规定的方法制作。 5.2.3 显微镜观察 在显微镜下观察孢囊、二龄幼虫、雌虫和雄虫的形态特征，拍照。 2 NY/T 3533—2020 5.2.4 形态学鉴别特征 禾谷孢囊线虫 孢囊：柠檬形，颈较长。阴门锥突出，膜孔为双膜孔，近圆形，有泡状突，无下桥。 雄虫：线形，体环清楚，侧线4条，两端钝，口针基部球圆形。 二龄幼虫：线形，体环清楚，侧线4条。唇区较高，前端圆，缢缩较明显，口针强壮，基球大，前缘平或稍 凹。尾圆锥形，透明尾较长。 菲利普孢囊线虫 孢囊：柠檬形，阴门锥突出，膜孔为双膜孔，近马蹄形，泡状突发育良好，有下桥。 雄虫：唇区具有4个头环，突出。口针强壮，基球大。侧线4条。尾短平滑。 二龄幼虫：唇部缢缩，2个微弱的头环。口针强壮，基球大。侧线4条。尾稍钝。 禾谷孢囊线虫和菲利普孢囊线虫形态差异 2种线虫形态相似，主要区别见表1。具体描述参见附录 A。 表 1 禾谷孢囊线虫和菲利普孢囊线虫主要形态差异 种名 阴门膜孔 泡状突 阴门裂 下桥 禾谷孢囊线虫 双膜孔，近圆形 发达，黑棕色，数量多，形状各异 12μm ～13μm 无下桥 菲利普孢褒线虫 双膜孔，似马蹄形 较弱或中度发达，数量少，呈明显球形 7μm ～11μm 下桥发育良好 5.2.5 结果判定 按照5.2.4的规定判定。 6 监测方法 6.1 系统调查 6.1.1 调查点设定 选择发病的小麦地块2块～3块，每块666.7m2, 作为系统调查固定观察点。 6.1.2 孢囊及卵量调查 在小麦播种前或小麦收割后，采用Z 形采样法，取5 cm～20 cm的根际土壤，每块采集25个点，将所 取土样充分混合后，取1 kg 左右装入样品袋，注明采样时间、地点等，室内摊开自然风干。称取200 g 风 干土样，宜采用简易漂浮法(参见附录B 中 B.2) 分离土壤中孢囊，在体视显微镜下计数。随机挑取、挤破 10个孢囊，制备卵悬浮液，计算每克土样中的卵量，调查结果记人附录C 中的表C.1。 6.1.3 发育进度调查 冬麦区，小麦出苗后，冬前每15 d 调查1次，翌春返青期、拔节期