现代分子生物学试题及答案.pdfVIP

. 现代分子生物学习题与答案 一、填空题 1．基因工程是70 年代发展起来的遗传学的一个分支学科. 2 ．基因工程的两个基本特点是： 1 分子水平上的操 作,2细胞水平上的表达 3 ．基因克隆中三个基本要点是：克隆基因的类型；受体的 选择；载体的选择 4 ．通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定 基因区域所得到的不同大小的片段 ,可以构建显示该区域各 限制性内切核酸酶切点相互位置的限制性酶切图谱. 5 ．限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的, 第一个大写字母取自属名的第一个字母,第二、三两个字母取 自_种名的前两个字母,第四个字母则用株名表示. 6 ．部分酶切可采取的措施有：1减少酶量；2缩短反应 时间；3增大反应体积等. 7 ．第一个分离的限制性内切核酸酶是EcoK ；而第一个用于 构建重组体的限制性内切核酸酶是_ EcoRl. 8．限制性内切核酸酶BsuRI 和HaeⅢ的来源不同,但识别的 序列都是GGCC,它们属于异源同工酶. 9 ．DNA 聚合酶I 的Klenow 大片段是用_枯草杆菌蛋白酶切 割DNA 聚合酶I 得到的分子量为76kDa 的大片段,具有两种 酶活性： 15-3合成酶的活性；23-5外切核酸酶的活 性. 10．为了防止 DNA 的自身环化,可用碱性磷酸酶去双链 DNA_5’端的磷酸基团. 11．EGTA 是_Ca2+_离子螯合剂. 12．测序酶是修饰了的T7 DNA 聚合酶,它只有_5-3合成酶 的活性,而没有3-5外切酶的活性. 13．切口移位nick translation法标记DNA 的基本原理在于 利用DNA 聚合酶I 的__5一3外切核酸酶和5一3合成酶的 作用. 14．欲将某一具有突出单链末端的双链DNA 分子转变成平 末端的双链形式,通常可采用____S1 核酸酶切割或DNA 聚合 1 / 30 . 酶补平. 15．反转录酶除了催化DNA 的合成外,还具有__核酸水解酶 H 的作用,可以将DNA- RNA 杂种双链中的_RNA_水解掉. 16．基因工程中有3 种主要类型的载体：质粒DNA,病毒DNA, 质粒和病毒DNA 杂合体. 17．就克隆一个基因DNA 片段来说,最简单的质粒载体也 必需包括三个部分：__复制区：含有复制起点；选择标记： 主要是抗性基因；克隆位点：便于外源 DNA 的插入.另外, 一个理想的质粒载体必须具有低分子量. 18．一个带有质粒的细菌在有EB 的培养液中培养一段时间 后,一部分细胞中已测 不出质粒,这种现象叫质粒消除或治愈. 19． pBR322 是一种改造型的质粒,它的复制子来源于pMBl, 它的四环素抗性基因来自于 pSCl01,它的氨苄青霉素抗性基 因来自于pSF2124R 质粒. 20 ．YAC 的最大容载能力是1000kb,BAC 载体的最大容载能 力是300kb. 21 ．pSCl01 是一种严紧复制的质粒. 22 ．pUCl8 质粒是目前使用较为广泛的载体.pUC 系列的载体 是通过pBR322 和M13 两种质粒改造而来.它的复制子来自pMBl,Amp 抗性基因则是来自转座子. 23 ．噬菌体之所以被选为基因工程载体 ,主要有两方面的原 因：一是它在细菌中能够大量繁殖,这样有利于外源DNA 的 扩增；二是对某些噬菌体如噬菌 的遗传结构和功能研究 得比较清楚,其大肠杆菌宿主系统的遗传也研究得比较详尽. 24 ．野生型的M13 不适合用作基因工程载体,主要原因是没 有合适的限制性内切核酸酶识别位点和选择标记. 25 ．黏粒cosmid是质粒—噬菌体杂合载体,它的复制子来自 质粒、COS 位点序列来自噬菌体,最大的克隆片段达 到45 kb. 26 ．野生型的噬菌体DNA 不宜作为基因工程载体,原因是： 2 / 30