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本发明公开了一种采用K562细胞扩增NK细胞的方法,包括如下步骤:采用重组慢病毒对K562细胞进行感染,感染时间为10‑20h,通过流式细胞术和有限稀释法进行克隆得到工程细胞株;然后采用钴‑60辐照灭菌得到滋养细胞;采用外周血分离单个核细胞,然后加入至NK细胞完全培养基中重悬,加入滋养细胞混合均匀,置于37℃、二氧化碳浓度为2‑6%的培养箱中培养;培养至第3天时,离心弃掉上清液,加入相同体积的NK细胞完全培养基混合均匀,继续置于37℃、二氧化碳浓度为2‑6%的培养箱中培养;培养至第7天,补加1‑
(19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 114874986 A (43)申请公布日 2022.08.09 (21)申请号 202210682587.3 C12N 13/00 (2006.01) (22)申请日 2022.06.
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