碳水化合物含量的检测.ppt

（2）适用范围及特点 本法又称Lan-Eynon Method，准确度高、重现性好，是一种快速简单的方法。国际标准方法，但该法试剂操作要求严格，终点不易判断，对于初学者不易掌握。该法是葡萄酒、果酒标准中测定还原糖、总糖的标准方法。 第三十页，共五十五页，2022年，8月28日 （3）试剂组成 甲液：硫酸铜 乙液：酒石酸钾钠 + 氢氧化钠 指示剂：次甲基蓝 第三十一页，共五十五页，2022年，8月28日 糖量表.doc 第三十二页，共五十五页，2022年，8月28日 4、萨氏(Somogyi)法 (1)原理 将一定量的样液与过量的碱性铜盐溶液共热，样液中的还原糖定量地将二价铜还原为氧化亚铜，生成的氧化亚铜在酸性条件下溶解为一价铜离子，并能定量地消耗游离碘，碘被还原为碘化物，而一价铜被氧化为二价铜。剩余的碘用硫代硫酸钠标准溶液滴定，同时做空白试验，根据硫代硫酸钠标准溶液消耗量可求出与一价铜反应的碘量，从而计算出样品中还原糖含量。各步反应式如下： 2Cu+ + I2 = 2Cu2+ +2 I- I2 + 2 Na2S2O3 = Na2S4O6 + 2 NaI 第三十三页，共五十五页，2022年，8月28日 (2)适用范围及特点 该法又称Somogyi法，是一种微量法，检出量为0.015-3mg。灵敏度高，重现性好，结果准确可靠。因样液用量少，可用于生物材料或经过层析处理后的微量样品的测定。终点清晰，有色样液不受限制。 第三十四页，共五十五页，2022年，8月28日 (二)碘量法 1、原理 样品经处理后，取一定量样液于碘量瓶中，加入一定量过量的碘液和过量的氢氧化钠溶液，样液中的醛糖在碱性条件下被碘氧化为醛糖酸钠， 由于反应液中碘和氢氧化钠都是过量的，两者作用生成次碘酸钠残留在反应液中，当加入盐酸使反应液呈酸性时，析出碘，用硫代硫酸钠标准溶液滴定析出的碘，则可计算出氧化醛糖消耗的碘量，从而计算出样液中醛糖的含量。 第三十五页，共五十五页，2022年，8月28日 醛糖 + I2 +3 NaOH = 醛糖酸钠 + 2 NaI +2H2O I2 + 2 NaOH = NaIO + NaI + H2O NaIO + NaI + 2 HCl = I2 + 2 NaCl + H2O I2+2Na2S2O3 =2NaI+Na2S4O6 2、适用范围 本法用于醛糖和酮糖共存时单独测定醛糖。 3、应用 第三十六页，共五十五页，2022年，8月28日 （三）酶---电极法 （四）3,5—二硝基水杨酸比色法 1、原理：在NaOH和丙三醇存在下，还原糖能将3,5—二硝基水杨酸比色法中的硝基还原为氨基化合物。此化合物在过量的氢氧化钠碱性溶液中呈橘红色，在540nm波长处有最大吸收，其吸光度与还原糖含量呈线性关系。 2、方法特点：（1）准确度高、重现性好，操作简便、快速；（2）适合于大批量样品的测定，而且样品不需进行特别处理。 第三十七页，共五十五页，2022年，8月28日 （五）还原糖测定仪法 （六）HPLC法 （七）酚—硫酸比色法 1、原理：糖类物质与浓硫酸作用脱水，生成糠醛或糠醛衍生物；然后与苯酚反应，生成黄至橙色化合物，吸光度与糖含量成线性关系。 2、方法特点：简便、快速、灵敏、重现性好，适用于各类样品中还原糖的测定，但要注意其他物质对测定结果的干扰。 第三十八页，共五十五页，2022年，8月28日 第三节 蔗糖含量的测定 蔗糖是葡萄糖和果糖组成的双糖，没有还原性，不能用碱性铜盐试剂直接测定，但在一定条件下，蔗糖可水解为具有还原性的葡萄糖和果糖（转化糖）。因此，可以用测定还原糖的方法测定蔗糖含量。对于纯度较高的蔗糖溶液，其相对密度、折光率、旋光度等物理常数与蔗糖浓度都有一定关系，故也可用物理检验法测定。这里介绍还原糖法。 第三十九页，共五十五页，2022年，8月28日 第一页，共五十五页，2022年，8月28日 （2）按组成分单糖：常见5C：木糖、核糖、阿拉伯糖； 6C：葡萄糖、果糖、半乳糖低聚糖：二糖：麦芽糖、乳糖、蔗糖 海藻糖 三糖：棉籽糖多糖：营养性多糖：淀粉、糊精 构造性多糖：纤维素、果胶、木质素、半纤维素等。（3）按是否具有还原性分还原糖：分子中具有醛基或酮基的单糖和有潜在醛基的 双糖都具有还原性。非还原糖：不具有还原性的糖