任务9 胡椒碱含量的测定.pptxVIP

农产品检测技术项目九 其他农产品检验任务9 胡椒碱含量的测定项目九其他农产品检验一、测定意义二、测定方法及测定原理三、仪器用具四、试剂五、操作步骤六、结果计算一、测定意义胡椒碱含量的测定 香辛料是一类具有调味和改善食品品质作用的农产品，利用具有香辛味道的植物种子、果实、叶茎、根块等制成的干燥粉末或提取物。香辛料含有挥发油（精油）、辣味成分及有机酸、纤维、淀粉粒、树脂、黏液物质、胶质等成分，具有刺激性香味，赋予食物以风味，增进食欲，帮助消化和吸收的作用。有些香辛料还有相当数量的防止氧化的物质，具有抗菌防腐的作用，同时还有特殊生理药理作用。胡椒（果实）可防腐，有强烈的芳香和麻辣味，颜色有黑、白之分，一般常用白胡椒。可提取胡椒碱、胡椒林碱、胡椒油碱甲、胡椒油碱乙、胡椒油碱丙等生物碱和挥发油。二、测定方法及测定原理胡椒碱含量的测定测定方法： GB/T 17528-2009《胡椒碱含量的测定》，高效液相色谱法。测定原理：将研碎的黑胡椒用乙醇加热回流，可以很方便地萃取出胡椒碱在萃取液中除了含有胡椒碱和佳味碱以外，还含有酸性树脂类物质。在提纯胡椒碱时，为了防止这些酸性物质与胡椒碱一起析出，常常将氢氧化钾的醇溶液加到浓缩的萃取液中，目的是使这些酸性物质成为钾盐保留在溶液中，而让胡椒碱从溶液中析出。三、仪器用具胡椒碱含量的测定1、高效液相色谱仪（配有紫外检测器）2、组织捣碎机3、样品筛（孔径为500微米）4、棕色圆底烧瓶（100mL，配套冷凝回流装置）5、棕色容量瓶（10mL，25mL，100mL）四、试剂胡椒碱含量的测定1、乙醇(CH3CH2OH)：95%（质量分数）。2、甲醇(CH3OH)：色谱纯。3、胡椒碱标准物质：纯度≥98%。4、胡椒碱标准溶液：准确称取（10±0.1）mg胡椒碱标准物质于10mL棕色烧中，用乙醇溶解，转移至10mL棕色容量瓶中，用乙醇定容至刻度，此溶液的质量浓度为1000mg/L（临用时配制）。 5、胡椒碱标准工作液：用微量移液器吸取50微升胡椒碱标准溶液，置于25mL棕色容量瓶中，加乙醇稀释至刻度，此溶液的质量浓度为2.00 mg/L。五、操作步骤胡椒碱含量的测定1、试样制备（1）整粒胡椒 用捣碎机将样品粉碎，直至全部通过样品筛，储于棕色瓶中备用。（2）胡椒粉 将所有样品通过样品筛，不能通过筛网的，用捣碎机粉碎，直到粒径达到要求为止，储于棕色瓶中备用。（3）胡椒油树脂 使样品充分均匀化。五、操作步骤胡椒碱含量的测定2、提取（1）从制得的胡椒试样或胡椒粉试样中称取0.2g～0.5g试料，精确至0.0001g，置于烧瓶中，加入50mL乙醇，装上回流冷凝管，加热至沸，保持回流3h，冷却至室温后，将溶液滤入100mL棕色容量瓶中，用乙醇少量多次冲洗抽提瓶和过滤器，洗液一并滤入容量瓶中，并加乙醇至刻度，摇匀备用。（2）从胡椒油树脂试样中称取0.05g～0.1g试料，精确至0.0001g，置于100mL棕色容量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀备用。五、操作步骤胡椒碱含量的测定3、标准曲线制备 准确吸取适量胡椒碱标准工作液，用乙醇稀释成质量浓度分别为0.40mg/L、0.80mg/L、1.20mg/L、1.60mg/L和2.0mg/L的标准溶液（现用现配），然后分别吸取10微升注入色谱仪测定并绘制标准曲线。五、操作步骤胡椒碱含量的测定4、色谱条件（1）色谱柱：C18，200 mm×4.6 mm，5?m，或相当者。（2）流动相：甲醇+水=77+23。（3）流速：1.0 mL/min。（4）色谱柱温度：30℃。（5）检测器波长：343 nm。 （6）进样量：10 ?L。五、操作步骤胡椒碱含量的测定5、胡椒碱含量的测定 准确吸取1mL～3mL提取液，置于25mL棕色容量瓶中，用乙醇稀释至刻度，然后吸取10微升注入色谱仪进行测定，与标准曲线比较求出胡椒碱的含量。同时做空白试验。六、结果计算胡椒碱含量的测定?式中：m——试料质量，单位为克（g）；?——测定试液中胡椒碱的质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）；V1——试料定容体积，单位为毫升（mL）；V2——分取提取液体积，单位为毫升（mL）。 计算结果保留三位有效数字。在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的10%，以大于这两个测定值的算术平均值的10%情况不超过5%为前提。此法的胡椒碱检出限为0. 008 g/100 g。