荧光和荧光光谱.pptxVIP

会计学; 良好的天平可测出10－5克的物质，微量化学分析可测出10－9克的物质，光谱分析可测出10－10克的物质，荧光分析可测出10－11～10－12克物质，一般的放射分则可测出10－18~10－19克的物质 (请参见：任时仁 编著“生物学中的放射必核技术”， 北京大学出版社，1997：P173； 潘中允 主编“简明核医学”，北京医科大与中国协和医科大联合出版社，1990：P139)。 因此，荧光分析法和放射分析法，尤其是后者，是目前最好的可用于对超微量物质进行高灵敏性测定的分析方法。;;荧光光谱法特点 灵敏度高、选择性强、用样少、方法简便以及能提供较多的物理参数等优点。 用途广泛， 如可用于研究溶液中蛋白质构象。 ;By Felix A. Carroll, Perspectives on Structure and Mechanism In Organic chemistry Brooks/Cole Publishing Company, 1998;第5页/共59页;;KASHA RULEPolyatomic molecular entities luminesce with appreciable yield only from the lowest excited state of a given multiplicity. There are exceptions to this rule. KASHA-VAVILOV RULEThe quantum yield of luminescence is independent of the wavelength of exciting radiation. There are exceptions to this rule. ;Anomalous Fluorescence Patterns in Corals We have noticed several kinds of anomalous patterns in corals that show up clearly in fluorescence but are not visible under white-light illumination. These include: bright or dark patches within areas of more uniform fluorescence isolated patches of fluorescent color color patterns that are only seen in fluorescence The significance of these effects is completely unknown, but they almost certainly point to underlying differences in internal chemistry.;White-light (left) and fluorescence (right) photographs of a coral, Roatan, Honduras. Note the yellow-fluorescent area in the photograph on the right that is not evident in the other image. ;2。基本知识： （－〕. 激发光谱与发射光谱;日立; 激发光 光源--激发单色器-------比色杯--透射光 | 荧光 | 荧光单色器 | 探测器(计算机) 荧光光度计示意图;第13页/共59页;第14页/共59页;第15页/共59页;第16页/共59页;第17页/共59页;荧光熄灭剂：引起荧光熄灭的物质。如：卤素离子， 重金属离子， 硝基化合物， O2等。 ;Protein: Fluorescence? 在蛋白质中，能发射荧光的氨基酸残基，只有:Try (348 nm), Tyr (303 nm)和Phe (282 nm)。个别蛋白质含有黄素腺嘌呤二核苷酸 (FAD)，也能发射荧光。 荧光光谱法是研究水溶液中蛋白质分子构象的一种新方法：通过测定蛋白质分子的自身荧光； 另一是向蛋白质的特殊部位，引入荧光探测剂， 然后测定荧光探测剂的荧光。;; 向蛋白质分子引入荧光探测剂