考研生化2核酸.pptxVIP

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;第 三 章 核酸的结构和功能;核 酸(nucleic acid) ;一、核酸的发现和研究工作进展 ;二、核酸的分类及分布 ;第一节 核酸的化学组成及其一级结构The Chemical Component and Primary Structure of Nucleic Acid;核酸的化学组成 ;嘌呤(purine) ;;戊 糖;核苷:AR, GR, UR, CR 脱氧核苷:dAR, dGR, dTR, dCR;核苷酸: AMP, GMP, UMP, CMP 脱氧核苷酸: dAMP, dGMP, dTMP, dCMP ;体内重要的游离核苷酸及其衍生物;5′端;二、核酸的一级结构;;第二节 DNA的空间结构与功能Dimensional Structure and Function of DNA;DNA的二级结构-双螺旋结构 DNA双螺旋结构的研究背景和历史意义 DNA双螺旋结构模型要点 DNA的超螺旋结构及其在染色质中的组装 DNA的超螺旋结构 原核生物DNA的高级结构 DNA在真核生物细胞核内的组装 DNA的功能;一、 DNA的二级结构 ——双螺旋结构;(一)DNA双螺旋结构的研究背景;(二) DNA双螺旋结构模型要点 (Watson, Crick, 1953);(二) DNA双螺旋结构模型要点 (Watson, Crick, 1953);碱基互补配对 ;(二) DNA双螺旋结构模型要点 (Watson, Crick, 1953);(三)DNA双螺旋结构的多样性;;产生   ?Z-DNA是比较特殊的,它与其他DNA不同之处在于它是在减数第一次分裂前期中的偶线期产生的,约占DNA总的0.3%。   结构 Z-DNA的双股螺旋为左旋型态,与B-DNA的右旋型态明显有所差别。其结构每两个碱基对重复出现一次。大小螺旋凹槽之间的差别较A型及B型小,只在宽度上有些微差异。这种型态并不常见,但某些特定情况可增加其存在的可能,如嘌呤-嘧啶交替序列、DNA超螺旋,或盐份与某些阳离子浓度高时。 Z-DNA能够与B-DNA构成相互结合型态,这种结构会使一对碱基突出于双螺旋之外。;生物学意义 ?? (1) 可能提供某些调节蛋白的识别。啮齿类动物病毒的复制起始部位有d(GC)有交替顺序的存在; (2)在SV40的增强子中有三段8bp的Z-DNA存在,若将其中2个Z-DNA片段除去,再接到b-珠蛋白基因上表达,表明增强子失去活性。当将野生型SV40的Z-DNA中“T”和“C”转换成“C”、“T”时,不影响突变体的活性,但嘧啶转换成嘌呤时,由于破坏了嘌呤-嘧啶的相间排列,而使Z-DNA难以形成,从而SV40也失活。另一个例子是??生动物纤毛虫,它有大、小两个核,大核有转录活性,小核和繁殖有关。大、小两核的DNA浓度相同。用B-DNA抗体以萤光标记后,显示和大、小两核都能结合,而Z-DNA抗体以萤光标记后,显示仅和大核DNA结合,而不和小核的DNA结合,说明大核DNA有Z-DNA的存在,可能和转录有关。;A-DNA ??;二、DNA的超螺旋结构及其在染色质中的组装;(二)原核生物DNA的高级结构;(三)DNA在真核生物细胞核内的组装;三、DNA的功能; RNA的结构与功能;RNA的种类、分布、功能;* mRNA的功能 把DNA所携带的遗传信息,按碱基互补配对原则,抄录并传送至核糖体,用以决定其合成蛋白质的氨基酸排列顺序。;一 、信使RNA的结构与功能;* mRNA结构特点;帽子结构;mRNA核内向胞质的转位 mRNA的稳定性维系 翻译起始的调控 ;* tRNA的一级结构特点 含 10~20% 稀有碱基,如 DHU 3′末端为 — CCA-OH 5′末端大多数为G 具有 T?C ;N,N二甲基鸟嘌呤;* tRNA的二级结构 ——三叶草形 氨基酸臂 DHU环 反密码环 额外环 TΨC环;;* rRNA的结构;* rRNA的种类(根据沉降系数);核蛋白体的组成;四、小分子核内RNA与RNA组学;核 酸 的 理 化 性 质 The Physical and Chemical Characters of Nucleic Acid;1. DNA或RNA的定量 OD260=1.0相当于 50μg/ml双链DNA 40μg/ml单链DNA(或RNA) 20μg/ml寡核苷酸 2.判断核酸样品的纯度 DNA纯品: OD260/OD280 = 1.8 RNA纯品: OD260/OD280 = 2.0;二、DNA的变性(denaturation);;例:变性引起紫外吸收值的改变;热变性; Tm:变性是在一个相当窄的温度范围内完成,在这一范围内,紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA

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