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实验五 植物组织蔗糖代谢关键物质测定
一、 实验目的
实验操掌握植物组织中蔗糖、氨基酸、果糖以及可洛性糖的测定原理和方法;熟悉
实验操
作与相关设备的使用。
二、 实验原理
水和醇可以溶解植物组织中 …… 把 PPT上内容抄下来
1、 氨基酸:氨基酸与苗三酮在加热或者弱酸条件下产生紫色化合物,可用比色 法在
570nm 波长处进行测定。
2、 蔗糖:蔗糖与强碱作用可降解为单糖,其中果糖为酮糖,在酸作用下,酮糖 脱水生 成疑甲基糠醛,后者再与间苯二酚作用生成红色物质,可用比色法在 480nm 波长处进行测 定。
3、 果糖:果糖为还原性糖, DNS (3,5-二硝基水杨酸)与还原性糖共热后被还原 成棕红
色的氨基化合物,此物质在 540nm 处有最大吸收峰,故可用比色法进行 测定。
4、 可溶性糖:糖在浓硫酸作用下,可经脱水反应生产糠醛或疑中基糠,生成的 糠醛或 者羟屮基糠醛可与蔥酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物,颜色深浅与糖浓度呈 正相关,此有色 物质在可见光的吸收峰为 620nm,故在此波长下进行比色。
三、 实验步骤
1、绘制标准曲线
① 氨基酸标准曲线
按照下表向各支试管中添加反应原料。(把 PPT±面的内容抄过来就行)
管号
试剂
1 2 3 4 5 6 7 8 9
加入乙醇后,混匀,倒入 lcm 比色皿中,在 540nm 波长处测定吸光度,绘制标 准曲线。
② 蔗糖标准曲线 待定
③ 果糖标准曲线
用上个实验的,照抄过来
④ 可溶性糖标准曲线
把 PPT上内容抄过来
2、提取
称取 O.lg 全麦粉,加入把 PPT上内容抄过来
3、测定
氨基酸:
蔗糖:
果糖:
可溶性糖:
四、实验结果与分析
1、氨基酸标准曲线 含量
A570
待测样品 A570 二 样品中氨基酸含量
2、蔗糖标准曲线
A480
3、果糖
A540
4、可溶性糖
A620
五、 误差分析
六、 实验总结
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