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HPLC分析方法验证指导原则 产品质量标准分析方法验证的目的是证明采用的方法适合于相应检测要求。 在建立产品质量标准时， 分析方法需经验证； 在产品生产工艺变更、 配方的组分 变更、原分析方法进行修订时， 则质量标准分析方法也需进行验证。 方法验证理 由、过程和结果均应记载在产品标准起草说明或修订说明中。 需验证的分析项目有： 鉴别试验， 杂质定量检查或限度检查， 有效成分含量 测定，以及其他成分（如防腐剂等）的测定。 验证内容有：准确度、精密度（包括重复性、中间精密度和重现性）、专属 性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。视具体方法拟订验证的内容。附表 中列出的分析项目和相应的验证内容可供参考。方法验证内容如下： 一、准确度 准确度系指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用 回收率（ % ）表示。准确度应在规定的范围内测试。 1．含量测定方法的准确度 原料药可用已知纯度的对照品或样品进行测定，或用本法所得结果与已 知准确度的另一个方法测定的结果进行比较。 制剂可用含已知量被测物的各组分混合物进行测定。如不能得到制剂的 全部组分， 可向制剂中加入已知量的被测物进行测定， 或用本法所得结果与已知 准确度的另一个方法测定结果进行比较。 如该分析方法已经测试并求出了精密度、线性和专属性，在准确度也可 推算出来的情况下，这一项可不必再做。 2 ．杂质定量测定的准确度 可向原料药或制剂中加入已知量杂质进行测定。如不能得到杂质或降解 产物，可用本法测定结果与另一成熟的方法进行比较， 如药典标准方法或经过验 证的方法。在不能测得杂质或降解产物的响应因子或对原料药的相对响应因子情 况下，可用原料药的响应因子。 应明确表明单个杂质和杂质总量相当于主成分的 重量比（ % ）或面积比（ % ）。 3 ．数据要求 在规定范围内，至少用 9 个测定结果进行评价，例如，设计 3 个不同浓 度，每个浓度各分别制备 3 份供试品溶液， 进行测定。 应报告已知加入量的回收 率（ % ），或测定结果平均值与真实值之差及其相对标准偏差或可信限。 （意见3 ：是否对所设定的浓度范围作出要求，如：该方法用于药品的 含量测定， 回收率试验的样品浓度应设定于含量 100 ％的 ±20 ％之间；用于溶出 （释放）曲线考察时，回收率试验的样品浓度应设定于全曲线范围的上、中、下 部位。） 二、精密度 精密度系指在规定的测试条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所 得结果之间的接近程度。精密度一般用偏差、标准偏差或相对标准偏差表示。 在相同条件下，由一个分析人员测定所得结果的精密度称为重复性；在 同一个实验室， 不同时间由不同分析人员用不同设备测定结果之间的精密度， 称 为中间精密度； 在不同实验室由不同分析人员测定结果之间的精密度， 称为重现 性。 含量测定和杂质的定量测定应考虑方法的精密度。 1．重复性 在规定范围内，至少用 9 个测定结果进行评价，例如，设计 3 个不同浓 度，每个浓度各分别制备 3 份供试溶液，进行测定。或 100% 的浓度水平，用至 少测定 6 次的结果进行评价。 2 ．中间精密度 为考察随机变动因素对精密度的影响， 应设计方案进行中间精密度试验。 变动因素为不同日期、不同分析人员、不同设备。 3 ．重现性 当分析方法将被法定标准采用，应进行重现性试验，例如，建立药