植物组织培养实习报告.docVIP

Word文档下载后可自行编辑修改很方便 PAGE1 / NUMPAGES1 植物组织培养实习报告 篇一：植物组织培育试验报告 植物组织培育试验报告 一、试验目的 1．把握无菌操作的植物组织培育方法； 2．通过配置MS培育基母液，把握母液的配置和保存方法； 3．通过诱导豌豆根、茎、叶形成愈伤组织 学习愈伤组织的建立方法； 4．通过诱导豌豆茎、叶形成愈伤组织 学习愈伤组织的建立方法； 5．了解植物细胞通过分裂、增殖、分化、发育, 最终长成完整再生植株的过程, 加深对植物细胞的全能性的理解。 二、试验原理 （一）植物组织培育 植物组织培育是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够连续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培育条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在肯定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。 （二）植物细胞的全能性 植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因，在肯定培育条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。 （三）组织的分化与器官建成 外植体诱导出愈伤组织后，经过继代培育，可以在愈伤组织内部形成一类分生组织即具有分生力量的小细胞团，然后，再分化成不同的器官原基。有些状况下，外植体不经愈伤组织而挺直诱导出芽、根。 （四）培育基的组成 培育基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需求的最佳条件相近，似胜利地用法该培育基进行组织培育的主要条件。养分培育基一般由无机养分、碳源和能源、维生素、植物激素（生长调整剂）和包括有机氮、酸和简单物质的添加剂组成。 三、试验器材 高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、培育室 镊子、记号笔、橡皮筋、玻 璃器皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、剪刀、棉塞、绳子、牛皮纸、酒精灯、喷雾器等。 四、试验材料 豌豆种子 五、试验药品 药品 、70% 酒精、 0.1% 升汞、MS培育基、蒸馏水、NaOH、 84消毒液、蔗糖、琼脂等。 六、试验步骤 （一）培育基母液的配制 表1.MS培育基个成分的含量（单位：mg/L） 表2.MS培育基所需母液以及扩大倍数 名称 大量元素 微量元素 Ca盐 Mg盐 Fe盐 有机 肌醇 激素 扩大倍数 50 50 50 50 50 100 100 100 定容体积(ml) 500 500 500 500 500 200 200 50 吸取毫升数/L 20 20 20 20 20 10 10 5 （注：吸取毫升数为每升培育基所吸取的母液的体积） 表3.配制母液所需的药品及称取量 （注：依据表1与表2计算各物质的称取量） 药品名称 NH4NO3 KNO3 KH2PO4 称取量（mg） 41250 47500 4250 药品名称 KI Na2MnO4?2H2O CuSO4?5H2O 称取量（mg） 20.75 6.25 0.625 CaCl2?2H2O 11000 CoCl2?6H2O 0.625 MgSO4?7H2O 9250 肌醇 2000 FeSO4?4H2O 695 甘氨酸 40 Na-EDTA 932.5 盐酸硫胺素 8 MnSO4?7H2O 557.5 盐酸吡哆醇 10 ZnSO4?7H2O 215 烟酸 10 H3BO3 155 （1） MS大量元素母液的配制 参考表3称取肯定量的下列药品用蒸馏水溶解，定容至500ML存放于冰箱中备用。 名称 重量（mg） 名称 重量(mg) NH4NO3 KNO3 41250 47500 KH2PO4 CaCl2·2H2O 4250 11000 （2） MS微量元素母液 参考表3称取肯定量的下列药品用蒸馏水溶解，定容至500ML存放于冰箱中备用。 名称 KI H3BO3 MnSO4·7H2O ZnSO4·7H2O 重量(mg) 20.75 155 557.5 215 名称 Na2MoO4·2H2O CuSO4·5H2O CoCl2·6H2O 重量(mg) 6.25 0.625 0.625 （3） MS有机母液 参考表3称取肯定量的下列药品用蒸馏水溶解，定容至200ML存放于冰箱中备用。 名称 肌醇 烟酸 盐酸吡哆醇 重量(mg) 名称 盐酸硫胺素 甘氨酸 重量(mg) 2000 10 10 8 40 （4） MS铁盐母液的配制 参考表3称取肯定量的下列药品用蒸馏水溶解，定容至500ML存放于冰箱中备用。 名称 EDTA二钠 重量(mg) 932.5 名称 FeSO4·4