【生物】现代生物学实验I..docx

一、填空题 现代生物学试验 I 习题及参考答案 |精. |品. |可. |编. |辑. |学. |习. |资. |料. * | * | * | * | |欢. |迎. |下. |载. 细胞生物学讨论中常用的光镜有 一般显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜、倒置显微镜； 细胞培育一般分为 原代培育 和 传代培育 两种情形； 感光片的种类很多，感色性是胶片的主要特性，依据这个特性一般黑白胶片分为 色盲片、分色片、全色片； 人口腔粘膜上皮细胞活体染色显示线粒体时用 1/5000 詹纳斯绿 B 染液 染成亮绿色； 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观看试验前两天给小鼠腹腔注射肉汤的目的 刺激小鼠腹腔产生较多巨噬细胞 ； 鉴别死活细胞用 0.4%台盼氏蓝染色液 染色； 过滤除菌常用的滤器 玻璃滤器、微孔滤器、蔡氏滤器或称赛氏滤器； 使用高压蒸汽锅灭菌时留意 排放冷空气 再升压，容器灭菌时不能使用 橡皮塞 以免炸裂； 干热灭菌的缺点是 传导较慢 ； 提取线粒体时匀浆机离心掌握在 0~4℃ 进行； 11、一般光镜样品的制备通常是将样品经过 固定剂（如甲醛） 固定后，包埋到 包埋剂 （如石腊）中，然后切成厚约 5μm 的薄切片，再经过 染色 ，以便进行观看； 12、目前在光镜水平对特异蛋白质等生物大分子进行定性定位讨论的最有力的工具是 荧光显微镜 技术，该技术包括 免疫荧光 技术和 荧光素直接标记 技术；在此基础上如要重构 出样品的三维结构，可采纳 激光共焦点扫描显微镜 技术； 13、超薄切片技术是基本的电镜试验技术，样品制备常常用的固定剂为 锇酸 和 戊二醛 、包埋剂为 环氧树脂 、切片机为 超薄切片机 、切片刀为 玻璃刀 ，电镜样品仅用 重金属盐 进行染色以形成 明暗 反差，因此，只能通过 电子束振幅 的转变观看到 黑白 图像； 14、观看线粒体和叶绿体基粒的精细结构时可采纳 负染色 电镜技术， 观看膜断裂面的蛋白质颗粒和膜表面结构时可采纳 冷冻蚀刻 电镜技术； 电镜 三维重构 技术主要用来分析难以形成三维晶体的膜蛋白以及病毒和蛋白质 -核酸复合物等大的复合体的三维结构， 扫描电镜 技术主要用来观看样品表面的形貌特点， 该技术具有 景深长 ，成像具有剧烈的 立体感 等特点； 15、 电镜三维重 技术与 X 射线晶体衍射 技术及 核磁共振分析 技术相结合， 是当前讨论生物大分子空间结构及其相互关系的主要试验手段； 16、常用采纳 低渗匀浆 、超声破裂 或 研磨 等方法将组织或细胞破旧，形成细胞器和细 胞组分的混合匀浆， 然后通过 差速离心 ，即利用不同的 离心速度 所产生的不同 离心力 ， 将各种亚细胞组分和各种颗粒分开； 17、 细胞分光光度计 和 流式细胞仪 均可测定某一细胞内核酸和蛋白质的含量，但 流式细胞仪 仍可用来测定细胞周期长短； 18、放射自显影技术是指 利用放射性同位素的电离辐射对乳胶（含和）的感光作用，对细 胞内生物大分子进行定性、 定位与半定量讨论 的一种细胞化学技术； 主要包括 同位素标记的生物大分子前体的掺与 和 细胞内同位素所在位置的显示 两个主要步骤，常常用于生物 学讨论的同位素有 32P 、 14C 、 3H 、 35S 和 131I ，讨论 DNA 合成时通常是用 3H-TdR ， RNA 合成时是用 3H-U ； 19、等渗溶液是指其 渗透压 与 血浆渗透压相等 的溶液； 20、在显示酸性磷酸酶在细胞内的存在与分布试验中，展片和固定过程均需要在 4℃条件下进行，其目的是 防止细胞内酸性磷酸酶失活 ； 21、当用非离子去垢剂（如 Triton-100 ）处理细胞时，细胞内的 蛋白质 被抽提出来，但细胞骨架蛋白质仍保持 非溶解 状态，留下同活细胞中结构完全一样的细胞骨架系统； 二、名词说明 1、等渗溶液：其渗透压与血浆渗透压相等的溶液称为等渗溶液； |精. |品. |可. |编. |辑. |学. |习. |资. |料. * | * | * | * | |欢. |迎. |下. |载. 2、等张溶液：能使悬浮于其中的红细胞保持正常体积和外形的盐溶液称为等张溶液； 3、詹纳斯绿 B（ Janusgreen B）：是对线粒体专一的活性细胞染料，毒性很小，属于碱性染料，解离后带正电，由电性吸引积累在线粒体膜上； 4、数值孔径（ N.A ）：是物镜和被检样品之间的介质的折射率 (n)与物镜所接受的光锥顶角 （亦称孔径角）的一半 α（半孔径角）正弦的乘积；即 N.A= n.Sin α； 5、辨论率：辨论率是指能辨论出的两个相邻质点间的最小距离；辨论距离越小，辨论率越 高；人眼的辨论率一般为 0.2mm，光学显微镜的辨论率为 0.2um 左右，其放大倍数为 1 000 倍，而电子显微镜的辨论率可达 0.2n