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1.下列关于凝胶色谱法的原理及操作不正确的是
A.是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法
B.在洗脱过程中,大分子不能进入凝胶内部而最先流出,而小分子可以进入凝胶内部而流速缓慢,以致最后流出
C.凝胶内部有很微细的多孔网状结构,其孔隙大小与被分离的物质分子的大小无相应关系
D.一般情况下,凝胶对要分离的物质没有吸附作用,因此所有要分离的物质都应该被洗脱出来;2.关于电泳的说法不正确的是
A.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程
B.带电分子会向着与其所??电荷相反的电极移动
C.蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少
D.用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳,蛋白质的电泳迁移率完全取决于分子的大小;3.下列操作正确的是
A.分离红细胞时采用低速长时间离心
B.红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水就可
C.分离血红蛋白溶液是低速短时间离心
D.透析时要用20 m mol/L的磷酸缓冲液,透析12 h;4.有关缓冲溶液的说法不正确的是
A.缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响,维持pH基本不变
B.缓冲溶液通常由1~2种缓冲剂溶解于水中配制而成
C.调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同pH范围内使用的缓冲液
D.生物体内进行的各种生物化学反应都是在一定的pH下进行;5.已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子,分子大小、电荷的性质和数量情况如图所示,下列有关蛋白质分离的叙述正确的是;解析:分子丙的相对分子质量大于戊,所以,在离心时戊存在于沉淀中,丙也一定在沉淀中,A项正确。用凝胶色谱法分离蛋白质时,甲相对分子质量最小,容易进入凝胶内部,则移动速度最慢,B项错误。分子丙的相对分子质量大于乙,则丙保留在袋内,乙可能在袋外,C项错误。SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移速度完全取决于分子的大小,因此,分子甲与丙形成的电泳带相距最远,D项错误。;6.如图表示血红蛋白提取和分
离的部分实验装置,请据图回
答下列问题。
(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物
红细胞的主要组成成分,它在红
细胞中的作用体现了蛋白质具有
________功能。
(2)甲装置中,B是血红蛋白溶液,
则A是______ __;乙装置中,C溶液的作用是________
(3)甲装置用于____ ____透析(粗分离)目的是____________
用乙装置分离蛋白质的方法叫____________,是根据____________ 分离蛋白质的有效方法。
(4)用乙装置分离血红蛋白时,待____________ 时,用试管收集流出液,每5 mL收集一管,连续收集。;6.红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成,血红蛋白的主要功能是携带O2和CO2,我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题:
(1)血红蛋白的提取和分离一般可分为四步:________、粗分离、纯化和________。
(2)实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。
①加入柠檬酸钠的目的是________________________________________。
②以上所述的过程即是样品处理,它包括红细胞的洗涤、______________、______________。;(3)收集的血红蛋白溶液要进行粗分离,其方法是_____________________。
(4)然后通过____________将样品进一步纯化,最后经 进行纯度鉴定。样品纯化的目的是__________________________________________。
(5)电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及 、形状的不同,使带电分子产生不同的迁移速率,从而实现样品中各种分子的分离。;7、凝胶色谱技术是一种快速而又简单的分离技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质有很高的分离效果,目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛应用,不但应用于科学实验研究,而且已经大规模地用于工业生产。据图回答下列问题:
(1)a、b均为蛋白质分子,其中先从层析柱中洗脱出来的是__________,原因是____________________________________________________________________________
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