机械搅拌罐培养大肠杆菌.pptxVIP

微生物发酵工程实验 环境与生物工程实验教学中心;实验六、机械搅拌罐培养大肠杆菌 ; 1、学会发酵参数的设置。 2、掌握发酵液参数的测定方法。; 微生物在发酵培养的过程中其体系参数会发生变化。本实验通过使用机械搅拌罐发酵培养大肠杆菌后测定其发酵液的菌体量、葡萄糖浓度、pH值。 采用分光光度计法在波长620nm下测定其浊度进行菌体量分析；利用pH计测定其pH值；葡萄糖浓度的测定采用3,5-二硝基水杨酸比色定糖法，其原理为 3，5一二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原???棕红色的氨基化合物，在一定范围内，棕红色物质颜色的深浅程度与还原糖的量成正比。;三、实验材料;四、实验步骤;（三）取样 每次取样时将管口先流出的10ml培养液作为废液，取随后流出的20ml。 （四）发酵结束处理 剩余菌液进行灭菌处理，排放到指定地点，进行罐的清洗。 ;（五）取样分析 1.取样菌体量的分析：测定620nm浊度。 2.葡萄糖浓度的测定：3,5-二硝基水杨酸比色定糖法（DNS法） （1）标准曲线的制作 取九支试管，编号，按下表加入各种试剂。将各管快速摇动混匀，在沸水浴中加热 5min,取出后立即用水冷却到室温，再向每支试管中加入21.5ml蒸馏水,摇匀,于520nm波长测A值,以葡萄糖mg数为横坐标,光吸收值为纵坐标，绘制标准曲线。 ;  （2）样品测定 取离心的上清夜稀释，取1ml于试管中，加蒸馏水1ml，加3,5-二硝基水杨酸试剂1.5ml，加完试剂后同以上操作，测定吸光值，在标准曲线上查出葡萄糖的含量，计算培养基中葡萄糖的量。; (1) 以时间为横坐标，菌体数量，浊度，葡萄糖浓度，pH为纵坐标作图，观察各参数的变化。 (2)计算最大比生长速率和葡萄糖的比消耗速率。; 1.机械搅拌罐培养大肠杆菌接种和取样过程中应注意避免造成污染和正确使用设备。 2.注意正确使用离心机并注意安全。 3.酸度计的正确使用。;七、思考题 机械搅拌罐在培养大肠杆菌的过程中和发酵液参数的测定要注意哪些问题？ ;9、要学生做的事，教职员躬亲共做；要学生学的知识，教职员躬亲共学；要学生守的规则，教职员躬亲共守。7月-217月-21Wednesday, July 21, 2021 10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。16:37:1116:37:1116:377/21/2021 4:37:11 PM 11、一个好的教师，是一个懂得心理学和教育学的人。7月-2116:37:1116:37Jul-2121-Jul-21 12、要记住，你不仅是教课的教师，也是学生的教育者，生活的导师和道德的引路人。16:37:1116:37:1116:37Wednesday, July 21, 2021 13、He who seize the right moment, is the right man.谁把握机遇，谁就心想事成。7月-217月-2116:37:1116:37:11July 21, 2021 14、谁要是自己还没有发展培养和教育好，他就不能发展培养和教育别人。21 七月 20214:37:11 下午16:37:117月-21 15、一年之计，莫如树谷；十年之计，莫如树木；终身之计，莫如树人。七月 214:37 下午7月-2116:37July 21, 2021 16、提出一个问题往往比解决一个更重要。因为解决问题也许仅是一个数学上或实验上的技能而已，而提出新的问题，却需要有创造性的想像力，而且标志着科学的真正进步。2021/7/21 16:37:1116:37:1121 July 2021 17、儿童是中心，教育的措施便围绕他们而组织起来。4:37:11 下午4:37 下午16:37:117月-21