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致病性大肠埃希氏菌及其检验;大肠埃希氏菌,俗称大肠杆菌,是人类和动物肠道中正常菌群的主要成员,每克粪便中约含109个.大肠埃希氏菌随粪便排出后,广泛分布于自然界.水、牛乳及其他食品一旦检出大肠埃希氏菌,即意味着这些物品直接或间接被粪便污染。;正常情况下,大肠埃希氏菌不致病,而且还能合成维生素B和维生素K,生产大肠菌素,对机体有利。但当机体抵抗力下降或大肠埃希氏菌侵入肠外组织或器官时,可作为条件致病菌而引起肠道外感染。有些血清型可引起肠道感染。致病性大肠埃希氏菌??主要分为五大类,首先根据发病机理分为三大类,1、产毒素型大肠埃希氏菌(ETEC),2、侵袭型大肠埃希氏菌(EIEC)3、肠道致病性大肠埃希氏菌(EPEC)近来又提出另外两类4、出血性大肠埃希氏菌(EHEC)
5、肠粘附性大肠埃希氏菌(EAEC);;1996年7月在日本就发生了大肠杆菌0157型引起的食物中毒,造成9017多人中毒,10人死亡,其原因与生食萝卜苗有关,其中92例并发出血性肠炎及出血性尿毒症。2001年,再江苏、安徽等地爆发的肠出血性大肠杆菌0157:H7食物中毒,造成177人死亡,中毒人数超过2万人。
如仔猪黄、白痢、猪水肿病、牛腹泻和败血症等均可由大肠杆菌引起。;一、埃希氏菌属生物学特性;培养特性
1)需氧及兼性厌氧菌
2)对营养的要求不高,在普通琼脂上就生长良好,在15C-45℃范围内均可生长,但最适生长温度为37℃,最适pH为7.2-7.4。
3)在普通琼脂平板上培养24小时,可形成圆形、凸起、光滑、湿润、半透明、边缘整齐、中等大小的菌落.其菌落与沙门氏菌比较相似,但是,大肠杆菌菌落对光(45角折射)观察可见荧光。
4)在肉汤培养基中生长18-24小时变为均匀浑,而后底部出现粘性沉淀物,并伴有臭味。
;;埃希氏菌在S.S琼脂平板上形成红色菌落;在麦康基培养基上培养的大肠埃希杆菌 大肠埃希杆菌产生粉红色乳糖发酵菌落。麦康基培养基是肠道细菌的选择培养基,含胆盐、乳糖和pH指示剂中性红。乳糖发酵菌落产生酸,将指示剂变红。(麦康基琼脂,18小时,37℃);革兰氏阴性杆菌 ;;革兰氏阳性杆菌;大肠杆菌扫描电镜照片;大肠杆菌透射电镜照片;大肠杆菌革兰氏染色照片 ;大肠杆菌平板菌落照片;一、埃希氏菌属生物学特性;;;M-甲基红(methyl red)实验葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇 甲基红 -葡萄糖→丙酮酸 甲基红 +;V-VP(Voges-Proskauer)试验
葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇→二乙酰→红色化合物+
胍基化合物
葡萄糖→丙酮酸 × × 乙酰甲基甲醇;C-枸橼酸盐利用(citrate utilization)试验;一、埃希氏菌属生物学特性;一、埃希氏菌属生物学特性;LT与ST的比较;一、埃希氏菌属生物学特性;一、埃希氏菌属生物学特性;3)K抗原
是细胞外部的荚膜或菌体表面物质,又称包膜抗原。新分离的大肠埃希氏菌70%具有K抗原。根据K抗原耐热的敏感性.可把K抗原分为A、B、L三类,共有103种,致病性大肠埃希氏菌的抗原主要为B抗原,少数为L抗原,B抗原与L抗原均可在煮沸后被破坏,A抗原耐热性强,可耐受煮沸1小时而不被破坏。,
O抗原可将大肠埃希氏菌分成若干血清群,再根据K抗原和H抗原进一步分为若干个血清型或亚型,根据大肠埃希氏菌抗原的鉴定结果,写出其抗原式如O111:K58(B)H12,一般认为H抗原与致病性无关,因此,一般不需要进行H抗原的鉴定。
;二、致病性大肠埃希氏菌的检验 ;二、致病性大肠埃希氏菌的检验;二、致病性大肠埃希氏菌的检验;EMB平板照片及原理;大肠杆菌在伊红美蓝琼脂平板上的特征
;EMB培养基,上为E.coli,下为伤寒杆菌 ;大肠杆菌在麦康凯琼脂(MacC)的特征;;沙门氏菌麦康凯琼脂平板菌落;二、致病性大肠埃希氏菌的检验;;枸椽酸盐试验原理及斜面照片;枸椽酸盐试验原理及斜面照片;大肠杆菌:MR + /VP -;注〕关于大肠杆菌的IMViC反应的说明
大肠杆菌IMViC试验的模式反应,在一般情况下应为“++--”或将“-+--”也包括在内,共代表了绝大多数大肠杆菌(占99%)的实际反应结果,因而受到了国际上的广泛承认,并将其列为大肠杆菌的常规鉴别IMViC反应公式。但个别大肠杆菌的IMViC反应,也可能出现“+---”和“++-+”等等异常现象。由于这种异常反应出现的频率极少,没有普遍性的代表意义,因而在分类鉴别和统计学上,可以忽略不计。 ;致病性大肠埃希氏菌的检验;致病性大肠埃希氏
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