动物微生物学实验.pptxVIP

实验三 培养基的制备 ;一目的要求 1.掌握一般培养基制备的原则和要求。 2.熟悉一般培养基制备的过程。;二.原理 牛肉膏蛋白胨培养基是培养腐生性细菌的常规培养基，也是微生物实验室中常备培养基，为天然培养基。它含有牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源，磷酸盐，蛋白胨主要提供氮源、NaCl提供无机盐。 牛肉膏 5.0g 食盐 5.0g pH 7.2-7.4 蛋白胨10.0g 自来水1000mL (加入1.5%-1.8%琼脂即成固体培养基);三 仪器材料 微波炉、高压灭菌器、玻璃器皿、PH试纸、牛肉??、蛋白胨、琼脂、氯化钠、氢氧化钠。;四 操作步骤 一)、培养基的制备原则和要求 1.药品纯净 , 称量准确。 2.所用器皿须洁净 3.准确测定调节pH值. 4.过滤培养基 5.严格控制灭菌时间和温度. 二)、培养基制备过程及方法 称量--加热溶化--过滤--PH滴定--分装--灭菌 ;1)肉浸液肉汤（普通肉汤）的制法 蛋白胨 10g，氯化钠 5g，磷酸氢二钾 2g。 牛肉粉或牛肉膏3g,水1000ml .PH7.4—7.6 121.3度15磅高压15钟. 2)营养琼脂培养基（普通琼脂）的制法 普通肉汤 1000ml 琼脂粉15g PH7.4—7.6 121.3度15磅高压15钟. 3)半固体培养基的制法 4）鲜血琼脂的制法;PH的滴定: 1.酸度计法 2.PH比色计法: ;五 注意事项 1.称量准确 2.加热搅拌 3.补足水分 4.容器适合 5.高压彻底 6.空白培养 ;六 作业与思考题 （1）为什么微生物实验室所用的移液管口或滴管口的上端均需塞上一小段棉茬再用报纸包起来，经高压蒸汽灭菌后才能使用? （2）配制培养基时为什么要调节pH? （3）制作平板培养基的注意事项是什么? （4）培养基配好后，为什么必须马上进行高压蒸汽灭菌?如不能及时灭菌时，应将培养基暂时放置何处?;四 操作步骤 一)、培养基的制备原则和要求 1.药品纯净 , 称量准确。 2.所用器皿须洁净 3.准确测定调节pH值. 4.过滤培养基 5.严格控制灭菌时间和温度. 二)、培养基制备过程及方法 称量--加热溶化--过滤--PH滴定--分装--灭菌