临床血液学检验：实验四 过氧化物酶染色（POX）.pptVIP

实验三 过氧化物酶染色（POX） 过碘酸-雪夫反应（PAS） 细胞化学染色Cytochemical Staining 实质是原位显示细胞成分结构，常为不移 动的有机化学物。 细胞化学染色包括三个步骤： 过氧化物酶染色Peroxidase Staining （POX） 1.原理： 传统方法----联苯胺法 过氧化氢 过氧化物酶 新生态氧 联苯胺 联苯胺蓝 亚硝基铁氰化钠 稳定的蓝色化合物 然后 10分钟 操作步骤 新鲜涂片 滴加A液3滴（覆盖标本即可） 滴加等量B液3滴,吹匀 水洗，甩干 甩干，镜检 滴加C液3滴，D液6滴混匀 5分钟 注意事项 （1）标本要新鲜 （2）试剂要室温，用后要盖好，防止挥发 （3）加试剂要充分混匀，使染色均匀 结果判断（100×） 胞浆中出现红棕色至蓝黑色颗粒为阳性反应 （—）无颗粒沉着 （弱+） 颗粒细小，分布稀疏 （+）颗粒较粗常呈局灶性分布 （++）颗粒粗大分布较密占胞浆1/2~2/3 （+++）颗粒粗大，呈团块状分布 （++++）颗粒布满细胞，可覆盖胞核 正常参考值 正常人淋巴细胞、红细胞、巨核细胞、成熟嗜 碱性粒细胞，均无POX； 粒细胞系统：早幼粒以下阶段细胞均为阳性，且逐渐加强，嗜酸粒细胞阳性最强 单核细胞内POX呈弱阳性。 临床意义1.辅助鉴别急性白血病的类型 急性粒细胞白血病 AML （+） 急性淋巴细胞白血病 ALL（-）(阳性率3％) 急性单核细胞白血病 AMOL（-/±） 2. 辅助鉴别急性早幼粒细胞白血病（APL)、急性 单核细胞白血病（AMOL)、恶性组织细胞病（MH) A: APL B: AMML C: AMOL D: ALL 过碘酸是一种氧化剂，能使细胞内含有乙二醇的糖类氧化产生双醛基，醛基与schiff试剂中的品红结合，形成紫红色化合物，定位于含有多糖成分的部位。 Periodic Acid-Schiff (PAS) reaction 过碘酸－雪夫反应（糖原染色) 操作步骤 涂片滴加A液3滴固定60秒 （DW冲洗，待干） 滴加B液（高碘酸）3滴氧化10 min， DW冲洗，待干 滴加C液（雪夫染液） 3滴氧化15 min， DW冲洗 待干 滴加D液（甲绿） 3滴复染5分钟 镜检 DW冲洗 待干 结果 阳性反应：胞质内染红色或紫红色，呈弥 散状、颗粒或块状。胞核染成绿色。 PAS反应 沉淀颗粒特点 粒系统 （+） 细颗粒状或均匀红色 淋巴系统 少数（+）（20％） 粗颗粒状或块状 单核系统 （+） 细颗粒状 红系 （-） 巨核系 （+） 颗粒状或块状 正常血细胞PAS染色特点 ?临床意义 1.鉴别淋巴系统增生的性质 恶性增生时多呈强阳性---ALL、CLL、淋巴瘤（红色颗粒或块状） 2.鉴别红系增生的性质 红血病、红白血病为强阳性 地中海贫血、IDA 、MDS为阳性 巨幼细胞性贫血、HA 、AA 阴性 3. 急粒大多数阴性/少数阳性（均匀分布颗粒） 4. 巨核系（血小板）阳性，有助于M7的诊断 5. Gaucher 细胞 (+)，Niemman-pick 细胞 (-/±) 注意事项： 1.试剂要在室温 2.雪夫试剂及时使用 3.结果及时观察，放置1周褪色 CLL ALL ALL ALL中粗粗粒散在分布 A:红白血病 B:巨幼贫 M6 PAS 染色 POX PAS 然后 10分钟 新鲜涂片 滴加A液3滴（覆盖标本即可） 滴加等量B液3滴,吹匀 水洗，甩干 甩干，镜检 滴加C液3滴，D液6滴混匀 5分钟 涂片滴加A液3滴固定60秒 （DW冲洗，待干） 滴加B液（高碘酸） 3滴氧化10 min， DW冲洗，待干 滴加C液（雪夫染液） 3滴氧化15 min， DW冲洗 待干 滴加D液（甲绿） 3滴复染5分钟 镜检 DW冲洗 待干 * 提供演示文稿的简要概述。 介绍演示文稿的重点及其重要的原因。 逐一介绍主要主题。 为了使观众了解演示文稿， 您可以 在整个演示文稿