粮食微生物 子任务1 平板划线法 项目七任务三.ppt

* * * * 平板划线接种技术 名词解释 平板划线分离法是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。有时这种单菌落并非都由单个细胞繁殖而来的，故必须反复分离多次才可得到纯种。其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的的。 1 实验原理 分类 划线的形式有多种，可将一个平板分成四个不同面积的小区进行划线 第一区(A区)面积最小，作为待分离菌的菌源区，第二和第三区(B、C区） 是逐级稀释的过渡区，第四区（D区)，则是关键区，使该区出现大量的 单菌落以供挑选纯种用。为了得到较多的典型单菌落，平板上四区面积 的分配应是DCBA 2 实验原理 操作步骤 融化培养基 将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基放入水浴中加热至融化。 1 倒平板 待培养基冷却至50℃左右，按无菌操作法倒2只平板（每皿约15mL），平置，待 凝固。 2 将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红 在火焰旁冷却接种环，并打开棉塞 将试管口通过火焰 将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液 将试管通过火焰，并塞上棉花 左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三到五条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养基。 灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线，重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连。 将平板倒置放入培养箱中培养。 步骤实施 * * * *