最详细CRISPRCas系统原理的应用及发展.pptVIP

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1基因修饰的方法 与各自优势 ◆质粒·瞬时转染-某些细胞效率偏低-表达结果不稳定,有 内源表达的干扰; ◆质粒-稳定细胞-表达结果不稳定,筛选效率不高,在重组 插入基因组中可能干扰其它基因表达; ◆病毒-瞬时感染·表达结果不稳定,质粒容易在细胞复制过 程中丢失,随机插入基因组中可能会干扰其它基因表达; ◆新一代的基因编辑技术利用重组酶在基因组水平修饰基 因,产生的遗传性质稳定,直接作用于内源,减少表达干扰, 目前有成熟的技术如 CRISPR/Cas9; DNA修复的机制与 基因编辑原理 NHE】 and HDe tfirwIedl repai 非同源性末端接合修复机制(Non- 同源介导的修复机制( Homology homologous end joining, NHEj directed repair, HDR) ZFN与 TALEN基因 编辑原理 ZFN and TALEN TALENs TALEs bind sing tides 獸 ZFs bind nudeotide triplets Genome Editing in Mammalian Cells = HE t Edrtns Me edits LOR C → Crossover pathwa Non- crossover pathway Models generated by CRISPR/Cas9 system Dum Zebrafish embryos Fruit fl

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