食品中细菌菌落总数的测定1课件.pptVIP

菌落总数的测定 (GB 4789.2 — 2010) 一、 目的 1 、 学习并掌握食品中菌落总数测定方 法和原理。 2 、了解菌落总数测定在对样品进行卫 生学评价中的意义 。 二、原理 1. 菌落总数 : 是指食品检样经过处理， 在一定条件下培养后，所得 1g 或 1mL 检 样中形成的细菌菌落总数。以 CFU/g （ mL ） 来表示。 一定条件包括培养基成分、培养温度 和时间、 pH 、是否需要氧气等。 2 . 菌落总数测定的卫生学意义 （ 1 ）菌落总数主要作为判别 食品被 污染程度 的标志，也可以应用这一方法 观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对 被检样品进行卫生学评价时提供依据。 （ 2 ） 食品中细菌 菌落总数越多 ，则 食品 含有致病菌 的可能性越大，食品 质 量越差 ；菌落总数越小，则食品含有致 病菌的可能性越小。须配合 大肠菌群和 致病菌 的检验，才能对食品做出较全面 的评价。 四、 流程 1 、检样 2 、做几个适当倍数的稀释液 3 、选择 2~3 个适宜稀释度各 1 mL, 分别加入 灭菌平皿内 4 、平皿内倾注 15 ～ 20 mL 琼脂培养基，混匀 5 、 36 ± 1℃ 培养 48 ± 2 小时或（ 24 ± 2 ）小 时 6 、 记录稀释倍数和相应的 各平板菌落数量 7 、 计算菌落总数 → 报告 五、 步骤 ( 一 ) 取样、稀释和培养 1 、 以无菌操作取检样 25g （ mL ）， 放 于 225mL 灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液 的 灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适量的玻璃珠） 或灭菌乳钵内，经充分振荡或研磨制成 1:10 的均匀稀释液。 。 （二） 菌落记录方法 做平板菌落数记录时，可用肉眼观察， 必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记 下各平皿的菌落总数后，求出 同稀释度 的各 平板平均菌落数 。 到达规定培养时间，应立即计数。如果 不能立即计数，应将平板放置于 0 ～4℃， 但 不要超过 24h 。 1 、 平皿菌落数的选择 选取菌落数在 30 ～ 300 之间的平板作 为菌落总数测定标准。每一个稀释度应 采用 两个平皿 ， 大于 300 的可记为多不 可计。 2 、其中一个平板有较大 片状菌落 生 长时，则不宜采用，而应以无片状菌落 生长的平板作为该稀释度的菌落数；若 片状菌落 不到平板的一半 ，而 其余一半 中菌落分布又很 均匀 ，则可以计算 半个 平板后乘以 2 ，以代表一个平板的菌落数 。 3 、当平板上有链状菌落生长时， 如呈 链状生长 的菌落之间无任何明显 界限，则应作为一个菌落计，如存在 有几条不同来源的链，则每条链均应 按一个菌落计算，不要把链上生长的 每一个菌落分开计数。 （三）菌落总数的计算 1 、若只有一个稀释度平板上的菌落数在 适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的 平均值 ，再将平均值 乘以相应稀释倍数 ， 作为每 g （ mL ）中菌落总数结果。 2 、若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜 计数范围内时，按公式（ 1 ）计算： 3 、 若所有稀释度的平板菌落数 均 300 ，则取 最高稀释度 的平均菌落数乘 以稀释倍数计算。 4 、若所有稀释度平板菌落数 均 30 ， 则以 最低稀释度 的平均菌落数乘稀释倍 数计算。 5 、若所有稀释度平板均 无菌落生长 ，则应按 1 乘以 最低稀释倍数 计算。 6 、若所有稀释度 均不在 30 ～ 300 之间 ，有的 300 ，有的又 30 ，则应以 最接 近 300 或 30 的平均菌落数乘以稀释倍数计 算。 （四） 菌落计数报告方法 1 、菌落数在 1 ～ 100 时，按四舍五入报 告 整数。 2 、 菌落数 ≥ 100 时，第三位数字按四舍 五入计算，取 前面两位有效数字 ，为了缩 短数字后面的零数，也可以 10 的指数表示 。 3 、若所有