沙门氏菌检测试剂盒说明书.docVIP

沙门氏菌检测试剂盒说明书 1．概述 REAGEN沙门氏菌酶联免疫检测试剂盒是用来检测食品和饲料中沙门氏菌的含量。沙门氏菌是肠杆菌家族的一种革兰氏阴性菌，作为一种食品传播疾病的传染源，在家禽、肉、鸡蛋中可发现沙门氏菌。通常沙门氏菌可导致沙门氏菌病，检测食品中沙门氏菌既费力又费时。 REAGENM沙门氏菌酶联免疫检测试剂盒为国家管理部门、食品生产商、质检部门提供了方便有效的方法，检测水平为105细胞/ml。 2．试剂盒原理 该试剂盒基于酶联免疫检测原理，沙门氏菌的单克隆抗体包被在微孔内。分析过程中，如果样品中有沙门氏菌存在，当加入样品时，即可与单抗结合，在孔中加入适当的培养液可以快速增菌。酶标记的二抗与板孔中包被的一抗结合，加入底物后颜色的深浅与样品中沙门氏菌的含量相关。 3. 试剂盒组成 抗体包被的酶标板(Salmonella antibody-coated Plate)（可拆式） 12×8 孔 1×阴性对照（1×Salmonella Negative Control）............. 1×1ml 1×阳性对照（1×Salmonella Positive Control）······· 1×1ml 50×HRP- 二抗(HRP-Conjugated Antibody #2)········· 3×50ml 二抗稀释液(Antibody #2 Diluent)........................... 1×20ml 20×浓缩洗液(Wash solution)............................... 1×28mL 终止液(Stop Buffer)....................................... 1×20mL TMB底物(TMB Substrate).................................... 1×12mL 本试剂盒应当在2-8℃的温度下储存，有效期为一年。如果超过3个月不使用试剂盒，请将阴性对照、阳性对照、二抗保存于-20°C。 4. 检测限：105细胞/ml 5.交叉反应：本试剂盒可检测沙门氏菌A、B、C、D、E血清型。 6．其他需要而本试剂盒未提的设备或材料 ü 酶标仪（450nm） ü 恒温培养箱 ü 漩涡振荡器 ü 移液器(10、20和100mL，1mL各一支) ü 多道移液枪：50-300ul（可选择） ü mGN培养基：包含10ug/ml新生霉素的GN培养基，可从市场上购买或按以下配方自制： 革兰氏阴性培养基（GN 培养基或Hajna GN培养基，pH7.0±0.2） 胰蛋白(Tryptose)..................................... 20.0g 葡萄糖(Dextrose)..................................... 1.0g D-甘露醇(D-Mannitol)................................. 2.0g 柠檬酸钠(Sodium citrate)............................. 5.0g 脱氧胆酸钠(Sodium desoxycholate)..................... 0.5g 磷酸氢二钾(Dipotassium phosphate).................... 4.0g 磷酸二氢钾(Monopotassium phosphate).................. 1.5g NaCl(Sodium chloride)................................ 5.0g 去离子水(Distilled water)............................ 1.0L 将上述成分溶解在水中，121°C高温灭菌15min，避免过度加 热。 ü 高压灭菌锅 ü 500ml培养瓶 ü 增菌培养基 ü 检测培养基 ü 去离子水 7.注意事项 实验前请阅读以下文字，以保证获得最佳实验效果。 ü 样品中含有沙门氏菌，请小心使用。 ü 进行样品准备过程中，操作人员必须有好的微生物操作技能。 ü 不要使用过期的试剂盒。 ü 不同批次的试剂盒不要混用，确保二抗正确稀释。 ü 尽量保持室温20-25℃，避免在通风口操作防止温度过低，过热和/或者蒸发。同样的，不要在阳光直射下实验，防止过热及蒸发。在孵育期间，如果工作台温度过低，应该铺垫若干纸巾或者其他物料