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第三章 食用菌菌种生产 本章重点:食用菌制种条件,制种工具的使用。 教学目的:熟练使用制种用品、用具、设备、设施进行制种生产。 第一节 食用菌菌种的概念 一、菌种的概念 原意是指孢子(相当于植物的种子),但在实际生产中,常将经过人工培养的纯菌丝体连同培养基质一同叫做菌种。 第二节 食用菌制种条件 一、食用菌制种程序 一、制种设施 晒料场 培养料摊晒和处理 原料库 存放原材料 装料库 培养料混合、分装 灭菌室 培养基灭菌 冷却室 培养基冷却 接种室 各级菌种分级 培养室 菌种培养 冷藏室 成种菌种短期存放 菌种保藏定义 ……. 二、生产设备 1 接种设备: 用于分离和扩大各级菌种的专业设备 包括接种室、接种箱、超净工作台、 接种工具 接种室 要求:内外两间,面积适宜,容易搞清洁,能进行灭菌 内间为接种工作间:5~6平方米,门窗紧密,尽量减少灰尘积累,内置工作台 外间为缓冲间:2~3平方米,用于进接种间前换衣、帽、鞋,同时为内间提供与外界相隔环境 内外间均为拉门,位置相互错开 体积应尽量小,利于彻底灭菌 装过滤空气的通风设施 内外间墙、地板、天花板、室内用具应尽量光滑易擦洗 接种箱 缩小的接种室 双人、单人操作型 易消毒、规模受限制 接种箱 超净工作台 局部净化设备 空气过滤除菌 无论接种箱还是净化工作台,均应放在较干净、空气中尘埃少的环境中,最好置于接种室内 超净工作台 接种工具 接种针 接种环 接种刀 接种铲 镊子 接种器等 酒精灯和接种工具 2 菌种培养设备 放置接种后各级菌种,并提供适宜温度和通气条件,使菌丝生长良好的专用设备 培养室 培养架:以操作方便为宜,宽0.7~1.2米,层间40cm 调温:电炉、红外线、暖气管、门窗、抽风机 测温:干湿球温度计 照明:避免使用蓝光 灭菌:紫外灯 三、培养设备 菌种培养室 培养箱(恒温箱) 根据需要使温度恒定在一定范围内,一般用于培养斜面试管和少部分原种 恒温培养箱 3、培养基加工设备 木材切片机 木片粉碎机 搅拌机 装瓶装袋机 4.灭菌设备: 灭菌:将环境中的所有微生物杀死。 一般采用热力灭菌设备 干热灭菌设备 原理:利用干燥热空气进行灭菌 灼烧灭菌:酒精灯 电热恒温干燥箱:160℃ 1~2小时 适宜玻璃器皿、金属用具灭菌 湿热灭菌设备 利用潮湿热空气进行灭菌 高压灭菌 手提式高压灭菌锅: 9瓶 立式高压灭菌锅: 45瓶 卧室园形高压灭菌锅 270瓶 卧式方形高压灭菌锅(消毒柜)500瓶 121℃ 20-60分钟 常压灭菌: 砖石 油桶 蒸笼等 105℃ 6~8小时 5、制种容器和消毒药品 容器 750ml 无色、浅色菌种瓶 聚丙烯菌种袋 消毒药品 甲醛 75%洒精 高锰酸钾 漂白粉、来苏儿 三、菌种厂选建 交通方便、水电充足 地势干燥、环境干净 空气清新、30米内没有畜禽圈舍、饲料仓库、排废工厂 有堆放、摊晒原料地 菌种厂设计 第四章 制种基本技术 知识目标 明确液体菌种制作过程 熟悉消毒与灭菌的分类与方法 菌种制作工艺流程及菌种质量鉴定、保藏的方法 (一)营养液制作 1. 准备工作 (二)原种、栽培种培养基 第二节 消毒与灭菌技术 (一)消毒(disinfection) 指杀灭物体中的病原微生物的方法。消毒只要求达到消除传染性的目的,而对非病原微生物及其芽胞、孢子并不严格要求全部杀死。 空间消毒法、表面消毒法、基质消毒法、煮沸消毒法 常用的消毒药品 酒精、甲醛、硫磺、多菌灵、克霉灵、气雾消毒剂、生石灰、高锰酸钾等、石碳酸。 紫外线灯30W 3.辐射杀菌法 1.紫外线灭菌 紫外线的穿透力弱,因此一般用于手术室、传染病房、细菌实验室的空气消毒。紫外线对人体皮肤、眼睛有损伤作用,应注意防护。 2.电离辐射 常用于一次性塑料制品的消毒。 3.微波 不能穿透金属表面。 4.滤过除菌法 滤过除菌法是用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌除去,以达到无菌目的。主要应用于一些不耐高温灭菌的血清、毒素、抗生素以及空气的除菌。 三、培养基的灭菌 第三节 菌种扩繁与培养 一、无菌操作 二、母种的接种(一)转管法 三、原种、栽培种的接种 5. 熬琼脂、定容 在沸腾状态下加入琼脂,直到琼脂完全溶化为止,定容至1000ml。 (二)营养液分装 1. 用注射器分装 2. 分装标准:分装量为试管长度的1/4—1/5。注意
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