植物油中9种抗氧化剂的测定方案凝胶渗透色谱法2原理.pdfVIP

植物油中9 种抗氧化剂的测定方案 （凝胶渗透色谱法） 1 适用范围 适用于食品中 PG 、THBP、TBHQ、NDGA 、BHA 、Ionox-100、OG、DG 、BHT 九 种抗氧化剂的测定。 参考标准： 《GB 5009.32-2016 食品安全国家标准食品中9 种抗氧化剂的测定》 2、原理 油脂样品经有机溶剂溶解后，使用凝胶渗透色谱（GPC ）净化 3、标准溶液的配置 分别称取没食子酸丙酯 （PG ），叔丁基对苯二酚 （TBHQ ），去甲二氢愈木创酸 （NDGA ），叔丁基对羧基茴香醚 （BHA ），2,6-二叔丁基-4-羧甲基苯酚 （Ionox- 100），没食子酸辛酯 （OG ），2,6-二叔丁基对甲基苯酚 （BHT ），没食子酸十二 酯 （DG ）10mg，用乙腈溶解并定容到10mL，得1000μg/mL的单标 称取 2,4,5- 三羧基苯丁酮 （THBP ）1mg ，用乙腈溶解并定容到 10mL ，得单标 100μg/mL 。 流动相配制：1L 环己烷和1L 乙酸乙酯混匀 4、提取步骤 精确称取取1g 油样于10ml 容量瓶中，以流动相定容至刻度，待净化 声明:除非另有说明，此报告结果仅对该测试样品负责。本报告未经公司许可，不可复制。 Add:浙江省金华市婺城区双林南街168 号 Tel:400-810-6969 邮编：321000 E-mail :yongzhang@ 加标过程：精确称取取1g 油样于10ml 容量瓶中，精确加入0.2mL 100 μg/mL 9 种抗氧化剂混标，以流动相定容至刻度，得加标量为 20mg/kg ，上机 浓度为5μg/mL 5、GPC 净化步骤 凝胶色谱条件如下：表1 凝胶色谱柱： 月旭Bio-beads S-X3 25*400mm （00823-00002 ） 流动相 乙酸乙酯/环己烷= 50/50 流速： 5.0 ml/min 进样量： 5.0ml 收集流出液: 14-25min 6、注意事项 （1）以上所有试剂需通过棕色容量小瓶保存，否则遇光会分解。GPC 进样注意别 把气泡打进去。9 种抗氧化剂易分解，实验过程样品应及时处理，不宜存放过久 （2 ）玉米油和9 种抗氧化剂在GPC 的出峰分离度85% （3 ）凝胶柱的方向不要接反，柱中不能进水 7、液相色谱条件 色谱柱：月旭Ultimate® XB-C18 ，5um ，4.6 ×250mm 流动相：A ：0.5% 甲酸水溶液；B ：甲醇 流速：1mL/min 声明:除非另有说明，此报告结果仅对该测试样品负责。本报告未经公司许可，不可复制。 Add:浙江省金华市婺城区双林南街168 号 Tel:400-810-6969 邮编：321000 E-mail :yongzhang@ 进样量：5μL 柱温：35℃ 检测波长：280nm 洗脱梯度： 时间min A ：0.5% 甲酸水溶液 B ：甲醇 0 60 40 20 30 70 25 0 100 35 0 100 8、GPC 图谱 图1、玉米油和9 种抗氧化剂混标GPC 图谱 图2 、9 种抗氧化剂混标2μg/mL GPC 图谱 声明:除非另有说明，此报告结果仅对该测试样品负责。本报告未经公司许可，不可复制。 Add:浙江省金华市婺城区双林南街168 号 Tel:400-810-6969 邮编：321000 E-mail :yongzhang@ 图3、植物油