SN／T 1182.1-2003_禽流感抗体检测方法　琼脂免疫扩散试验.pdfVIP

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 ／ — 犛犖犜１１８２．１ ２００３ 禽流感抗体检测方法 琼脂免疫扩散试验 　 ㅤㅤㅤㅤ — 犇犲狋犲犮狋犻狅狀犪狀狋犻犫狅犱犻犲狊犪犪犻狀狊狋犪狏犻犪狀犻狀犳犾狌犲狀狕犪狏犻狉狌狊 犵 犘狉狅犮狅狋狅犾狅犳犪犪狉犲犾犻犿犿狌狀狅犱犻犳犳狌狊犻狅狀狋犲狊狋 犵 犵 ２００３０３１７发布 ２００３０９０１实施 中 华 人 民 共 和 国 发 布 国家质量监督检验检疫总局 ／ — 犛犖犜１１８２．１ ２００３ 禽流感抗体检测方法 琼脂免疫扩散试验 　 １ 范围 　 本标准规定了禽流感琼脂免疫扩散试验操作规程。 本标准适用于检测禽类血清中是否含有禽流感（ ）病毒抗体。主要适用于禽类禽流感检疫、疫情 ＡＩ 监测和流行病学调查。 ２ 规范性引用文件 　 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。 ／ — 分析实验室用水规格及试验方法 ＧＢＴ６６８２ １９９２ 　 ３ 原理 　 抗原和抗体的分子量一般都在 万道尔顿以下，抗原及其特异性抗体在凝胶中从高浓度区域向低 ２０ ㅤㅤㅤㅤ 浓度区域扩散时所受阻力很小，基本上呈自由扩散形式。由于不同抗原分子的分子量、结构、形状和电 荷量不同，因此其扩散系数不同，在凝胶中的扩散速度也就不同。当抗原与相应抗体经扩散后在凝胶中 相遇，形成抗原抗体复合物，若两者在相遇处比例适当，则形成最大的复合物。由于复合物的分子量增 大，颗粒增大，因而不再继续扩散而产生沉淀，呈现出线状或带状，其形成的线状或带状被称为免疫沉淀 线或免疫沉淀带，因此，可根据抗原与被检血清之间是否出现沉淀线来判定被检血清中是否存在特异性 抗体。 ４ 材料准备 　 ４．１ 试剂：磷酸二氢钠（ＮａＨ ·２Ｈ ），磷酸氢二钠（ ·１２Ｈ ），氯化钠（ ），叠氮 ＰＯ Ｏ ＮａＨＰＯ Ｏ ＮａＣｌ 　 ２ ４ ２ ２ ４ ２ 钠，琼脂糖，均为分析纯。 ４．２ 琼脂扩散试验抗原、标准阳性血清：由指定单位供应。按说明书使用。 　 ４．３ 器材：吸管、量筒、平皿（规格为 ９０ｍｍ×１５ｍｍ）、三角瓶、外径约 ５ｍｍ金属打孔器、微量移液器