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Experiment 5 環境中之微生物 前言 生活中，無數的微生物環繞在你我身邊，看不見也摸不著，假若你想探索牠，就必須利用”培養”來做相關之檢驗。該實驗將以-土壤、廢水、空氣、廢棄物作為主要探討之對象。 目的 了解人類所居住的不同生活環境(地理位置)中，個個情況下微生物分部的情形；同時也探討環境因子(大氣中自然的流動、人為機械攪動及微生物粒子本身的運動)對於微生物的影響。 利用實驗相關數據，學會如何反推求得原環境下之菌數。 取樣地點/數量 取樣項目 採樣地點 採樣數量 廢水 實驗室前之水池 1 ml 土壤 實驗室前大樹下 1克 廢棄物 教室前方垃圾桶 9cm2 實驗器材 項目 所需數量 項目 所需數量 100㏄燒杯 3 洗滌瓶 1 500㏄燒杯 1 取藥杓 1 250㏄錐形瓶 1 玻璃試管 10 安全吸球 1 試管架 1 酒精燈 1 鑷子 1 三角彎棒 1 定量玻璃吸管 1 標籤 30 秤藥紙 1 360?旋轉盤 1 培養液 300ml 電子分析天平 1 二段水 500ml 培養基 22 酒精 30ml 稀釋倍數 取樣項目 稀釋倍數 廢水 10-4、10-5、10-6 土壤 10-8 、10-9、10-10 廢棄物 10-2、10-3、10-4 實驗步驟 廢水操作步驟: Step1:先將取水勺以水池水清洗三次 Step2:取池水源液約50ml備用 Step3:以定量玻璃吸管取1ml待測樣品並加入10ml培養液 Step4:開始10倍稀釋:取 1ml 1ml 1ml 1ml …… 待測樣品 9ml培養液 9ml培養液 9ml培養液 9ml培養液 (100) (10-1) (10-2) (10-3) (10-6) Step5:每個濃度塗碟2個培養基，計6個 Step6:放置於37℃培養箱培養，隔天計算菌落數 Step7:若為合理菌落數(30~300個)，推算回原廢水內芝菌量 (個/ml 廢水)表示以平均值±標準偏差 土壤操作步驟: Step1:於涼亭樹下取1克土壤 Step2:加入10ml培養液形成原液 Step3:開始10倍稀釋 1ml 1ml 1ml 1ml …… 待測樣品 9ml培養液 9ml培養液 9ml培養液 9ml培養液 (100) (10-1) (10-2) (10-3) (10-10) Step5:每個濃度塗碟2個培養基，計6個 Step6:放置於37℃培養箱培養，隔天計算菌落數 Step7:若為合理菌落數(30~300個)，計算原土壤之菌數(平均 值±標準差)個/克 土壤 廢棄物操作步驟: Step1:以乾淨衛生紙沾濕後，再盛裝廢棄物之垃圾桶擦拭約9cm2 (3x3cm) Step2:將擦拭過之衛生紙浸泡於10ml之培養液中，充分搖晃均勻，靜置後取菌液進行稀釋 Step3:連續10被稀釋法，取3個連續濃度塗碟 1ml 1ml 1ml 1ml 待測樣品 9ml培養液 9ml培養液 9ml培養液 9ml培養液 (100) (10-1) (10-2) (10-3) (10-4) Step5:每個濃度塗碟2個培養基，計6個 Step4:塗碟時，每個濃度塗兩個碟 Step5:於37℃下培養，隔天計算菌數並求出 個菌/cm2